2×PCR ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ (ಡೈ ಇಲ್ಲದೆ)
ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ ಒಂದು ರೀತಿಯ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರಿಮಿಕ್ಸ್ಡ್ ಪರಿಹಾರವಾಗಿದ್ದು, ಇದು ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್, ಡಿಎನ್ಟಿಪಿ ಮಿಕ್ಸ್ ಎಂಜಿಸಿಎಲ್ 2 ಮತ್ತು ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಬಫರ್ ಸೇರಿದಂತೆ ಬಳಸಲು ಸಿದ್ಧವಾಗಿದೆ.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ಪ್ರೈಮರ್ ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಮಾತ್ರ ಸೇರಿಸಬಹುದು, ಇದು ಪ್ರಯೋಗದ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯ ಹಂತಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಸರಳಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸ್ಟೆಬಿಲೈಜರ್ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು 4℃ ನಲ್ಲಿ 3 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.PCR ಉತ್ಪನ್ನವು 3′-dA ಮುಂಚಾಚಿರುವಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಸುಲಭವಾಗಿ T ವೆಕ್ಟರ್ ಆಗಿ ಕ್ಲೋನ್ ಮಾಡಬಹುದು.
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಎರಡು ವರ್ಷಗಳವರೆಗೆ -25℃~ -15℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು.
ವಿಶೇಷಣಗಳು
ನಿಷ್ಠೆ (vs.Taq) | 1× |
ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ | No |
ಓವರ್ಹ್ಯಾಂಗ್ | 3′-ಎ |
ಪಾಲಿಮರೇಸ್ | Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ |
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಸ್ವರೂಪ | ಸೂಪರ್ಮಿಕ್ಸ್ ಅಥವಾ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ |
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವೇಗ | ಪ್ರಮಾಣಿತ |
ಉತ್ಪನ್ನದ ಪ್ರಕಾರ | ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ (2×) |
ಸೂಚನೆಗಳು
1.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ
ಘಟಕಗಳು | ಗಾತ್ರ (μL) |
ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್ಎ | ಸೂಕ್ತ |
ಪ್ರೈಮರ್ 1 (10 μmol/L) | 2 |
ಪ್ರೈಮರ್ 2 (10 μmol/L) | 2 |
ಪಿಸಿಆರ್ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ | 25 |
ddH2O | 50 ಕ್ಕೆ |
2.ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
ಸೈಕಲ್ ಹಂತಗಳು | ತಾಪಮಾನ (°C) | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್ಗಳು |
ಪ್ರೀ-ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 94 ℃ | 5 ನಿಮಿಷಗಳು | 1 |
ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 94 ℃ | 30 ಸೆ | 35 |
ಅನೆಲಿಂಗ್ | 50-60 ℃ | 30 ಸೆ | |
ವಿಸ್ತರಣೆ | 72 ℃ | 30-60ಸೆಕೆಂಡ್/ಕೆಬಿ | |
ಅಂತಿಮ ವಿಸ್ತರಣೆ | 72 ℃ | 10 ನಿಮಿಷಗಳು | 1 |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು:
1) ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಬಳಕೆ: 50-200 ng ಜೀನೋಮಿಕ್ DNA;0.1- 10 ng ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ DNA.
2) ಎಂಜಿ2+ಏಕಾಗ್ರತೆ: ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಹೆಚ್ಚಿನ PCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ತವಾದ 3 mM MgCl2 ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ.
3) ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ: ದಯವಿಟ್ಟು ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ Tm ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಿ.ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಪ್ರೈಮರ್ನ ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ಮೌಲ್ಯಕ್ಕಿಂತ 2-5 ℃ ಕಡಿಮೆಗೆ ಹೊಂದಿಸಬಹುದು.
4) ವಿಸ್ತರಣೆ ಸಮಯ: ಆಣ್ವಿಕ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಗಾಗಿ, 30 ಸೆಕೆಂಡ್/ಕೆಬಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ಜೀನ್ ಕ್ಲೋನಿಂಗ್ಗಾಗಿ, 60ಸೆಕೆಂಡ್/ಕೆಬಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
1.ನಿಮ್ಮ ಸುರಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕ್ಕಾಗಿ, ದಯವಿಟ್ಟು ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಾಗಿ ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಕೈಗವಸುಗಳನ್ನು ಧರಿಸಿ.
2.ಸಂಶೋಧನಾ ಬಳಕೆಗೆ ಮಾತ್ರ!