ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ (ಹಾರ್ಸರಾಡಿಶ್ ಮೂಲ) ಸಮಾನಾರ್ಥಕ: ಹೈಡ್ರೋಜನ್ ಪೆರಾಕ್ಸೈಡ್ ಆಕ್ಸಿಡೋರೆಡಕ್ಟೇಸ್;HRP
ವಿವರಣೆ
ಹಾರ್ಸರಾಡಿಶ್ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ (HRP) ಅನ್ನು ಮುಲ್ಲಂಗಿ (ಅಮೊರಾಸಿಯಾ ರುಸ್ಟಿಕಾನಾ) ಬೇರುಗಳಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ಗಳ ಫೆರೋಪ್ರೊಟೊಪಾರ್ಫಿರಿನ್ ಗುಂಪಿಗೆ ಸೇರಿದೆ.HRP ಸುಲಭವಾಗಿ ಹೈಡ್ರೋಜನ್ ಪೆರಾಕ್ಸೈಡ್ (H2O2) ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸುತ್ತದೆ.ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ [HRP-H2O2] ಸಂಕೀರ್ಣವು ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಹೈಡ್ರೋಜನ್ ದಾನಿಗಳನ್ನು ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಿಸುತ್ತದೆ:
ದಾನಿ + H2O2 → ಆಕ್ಸಿಡೀಕೃತ ದಾನಿ + 2 H2O
HRP ವಿವಿಧ ತಲಾಧಾರಗಳನ್ನು ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಿಸುತ್ತದೆ (ಟೇಬಲ್ 1 ನೋಡಿ):
• ಕ್ರೋಮೋಜೆನಿಕ್
• ಕೆಮಿಲುಮಿನಿಸೆಂಟ್ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಲುಮಿನಾಲ್ ಅಥವಾ ಐಸೊಲುಮಿನೋಲ್)
• ಫ್ಲೋರೋಜೆನಿಕ್ (ಟೈರಮೈನ್, ಹೋಮೋವಾನಿಲಿಕ್ ಆಮ್ಲ, ಅಥವಾ 4-ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಫೆನೈಲ್ ಅಸಿಟಿಕ್ ಆಮ್ಲ)
HRP ಒಂದೇ ಸರಣಿ ಪಾಲಿಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಆಗಿದ್ದು ಅದು ನಾಲ್ಕು ಡೈಸಲ್ಫೈಡ್ ಸೇತುವೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ.HRP 18% ಕಾರ್ಬೋಹೈಡ್ರೇಟ್ ಹೊಂದಿರುವ ಗ್ಲೈಕೊಪ್ರೋಟೀನ್ ಆಗಿದೆ.ಕಾರ್ಬೋಹೈಡ್ರೇಟ್ ಸಂಯೋಜನೆಯು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಐಸೋಜೈಮ್ ಅನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸ್, ಅರಾಬಿನೋಸ್, ಕ್ಸೈಲೋಸ್, ಫ್ಯೂಕೋಸ್, ಮನ್ನೋಸ್, ಮ್ಯಾನೋಸಮೈನ್ ಮತ್ತು ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಮೈನ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ.
ಇಮ್ಯುನೊಬ್ಲೋಟಿಂಗ್, ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ ಮತ್ತು ELISA ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ಇಮ್ಯುನೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ಗಳಲ್ಲಿ ಇಮ್ಯುನೊಗ್ಲಾಬ್ಯುಲಿನ್ಗಳಿಗೆ HRP ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಲೇಬಲ್ ಆಗಿದೆ.ಗ್ಲುಟರಾಲ್ಡಿಹೈಡ್, ಪಿರಿಯಾಡೇಟ್ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ, ಡೈಸಲ್ಫೈಡ್ ಬಂಧಗಳ ಮೂಲಕ ಮತ್ತು ಅಮೈನೋ ಮತ್ತು ಥಿಯೋಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಕ್ರಾಸ್-ಲಿಂಕರ್ಗಳ ಮೂಲಕವೂ ಸೇರಿದಂತೆ ಹಲವಾರು ವಿಭಿನ್ನ ವಿಧಾನಗಳಿಂದ HRP ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಬಹುದು.HRP ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚು ಅಪೇಕ್ಷಿತ ಲೇಬಲ್ ಆಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು ಮೂರು ಅತ್ಯಂತ ಜನಪ್ರಿಯ ಕಿಣ್ವ ಲೇಬಲ್ಗಳಲ್ಲಿ (ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್, β-ಗ್ಯಾಲಕ್ಟೋಸಿಡೇಸ್, ಕ್ಷಾರೀಯ ಫಾಸ್ಫೇಟೇಸ್) ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿರವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಅದರ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲೇಷನ್ ಕಡಿಮೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.ಗ್ಲುಟರಾಲ್ಡಿಹೈಡ್ ಮತ್ತು ಆವರ್ತಕ ಸಂಯೋಗ ವಿಧಾನಗಳ ವಿಮರ್ಶೆಯನ್ನು ಪ್ರಕಟಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ ಅನ್ನು ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಗ್ಲೂಕೋಸ್ 4 ಮತ್ತು ಪೆರಾಕ್ಸೈಡ್ಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಹ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಹಲವಾರು ಪ್ರಕಟಣೆಗಳು, 6-24 ಪ್ರಬಂಧಗಳು, 25-29 ಮತ್ತು ಪ್ರಬಂಧಗಳು 30-46 ತಮ್ಮ ಸಂಶೋಧನಾ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ಗಳಲ್ಲಿ P8375 ಬಳಕೆಯನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಿವೆ.
ರಾಸಾಯನಿಕ ರಚನೆ
ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ
ಪರೀಕ್ಷಾ ವಸ್ತುಗಳು | ವಿಶೇಷಣಗಳು |
ವಿವರಣೆ | ಕೆಂಪು-ಕಂದು ಅಸ್ಫಾಟಿಕ ಪುಡಿ, ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ಡ್ |
ಚಟುವಟಿಕೆ | ≥100U/mg |
ಶುದ್ಧತೆ(SDS-PAGE) | ≥90% |
ಕರಗುವಿಕೆ (10mg ಪುಡಿ/ಮಿಲಿ) | ಸ್ಪಷ್ಟ |
ಕಲುಷಿತ ಕಿಣ್ವಗಳು | |
NADH/NADPH ಆಕ್ಸಿಡೇಸ್ | ≤0.1% |
ಕ್ಯಾಟಲೇಸ್ | ≤0.005% |
ATPase | ≤0.03% |
ಸಾರಿಗೆ ಮತ್ತು ಸಂಗ್ರಹಣೆ
ಸಾರಿಗೆ:2-8 °C ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ರವಾನಿಸಲಾಗಿದೆ
ಸಂಗ್ರಹಣೆ:-20 ° C (ದೀರ್ಘಾವಧಿ), 2-8 ° C (ಅಲ್ಪಾವಧಿ) ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ
ಮರು ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆಜೀವನ:2 ವರ್ಷ