ಫಾಸ್ಫಟೇಸ್ ಕ್ಷಾರೀಯ (ALP)
ವಿವರಣೆ
ಕ್ಷಾರೀಯ ಫಾಸ್ಫಟೇಸ್ ಅನ್ನು TAB5 ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮರುಸಂಯೋಜಕ E. ಕೋಲಿ ಸ್ಟ್ರೈನ್ ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.ಕಿಣ್ವವು ಡಿಎನ್‌ಎ ಮತ್ತು ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಫಾಸ್ಫೋಮೋನೋಸ್ಟರ್‌ಗಳ 5' ಮತ್ತು 3' ತುದಿಗಳ ಡಿಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಶನ್ ಅನ್ನು ವೇಗವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ.ಅಲ್ಲದೆ, ಇದು ರೈಬೋಸ್, ಹಾಗೆಯೇ ಡಿಯೋಕ್ಸಿರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಸೈಡ್ ಟ್ರೈಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ಗಳನ್ನು (NTPs ಮತ್ತು dNTPs) ಜಲವಿಚ್ಛೇದನಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.TAB5 ಕ್ಷಾರೀಯ ಫಾಸ್ಫೇಟೇಸ್ 5´ ಚಾಚಿಕೊಂಡಿರುವ, 5´ ಹಿನ್ಸರಿತ ಮತ್ತು ಮೊಂಡಾದ ತುದಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ.ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಥವಾ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ತುದಿಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಕ್ಲೋನಿಂಗ್ ಅಥವಾ ಪ್ರೋಬ್ ಎಂಡ್ ಲೇಬಲಿಂಗ್‌ನಂತಹ ಅನೇಕ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದ ಅನ್ವಯಗಳಲ್ಲಿ ಫಾಸ್ಫೇಟೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.ಕ್ಲೋನಿಂಗ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ, ಡಿಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಸ್ವಯಂ-ಬಂಧಕದಿಂದ ರೇಖಾತ್ಮಕ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ.ಡಿಎನ್‌ಎ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕಾಗಿ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಇದು ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ಅಸಂಘಟಿತ ಡಿಎನ್‌ಟಿಪಿಗಳನ್ನು ಸಹ ಕೆಡಿಸಬಹುದು.5 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 70 ° C ನಲ್ಲಿ ಬಿಸಿ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮತ್ತು ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗದಂತೆ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಬಂಧನ ಅಥವಾ ಅಂತ್ಯ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡುವ ಮೊದಲು ಫಾಸ್ಫೇಟೇಸ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದು ಅನಗತ್ಯ
ಬಳಕೆ
1. ಕ್ಷಾರೀಯ ಫಾಸ್ಫಟೇಸ್ ಅನ್ನು ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳಿಗೆ (ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು, ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟಾವಿಡಿನ್ ಇತ್ಯಾದಿ) ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಗುರಿಯ ಅಣುಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ELISA, WB ಮತ್ತು ಹಿಸ್ಟೋಕೆಮಿಕಲ್ ಪತ್ತೆಗೆ ಬಳಸಬಹುದು;
2.ಆಲ್ಕಲೈನ್ ಫಾಸ್ಫಟೇಸ್ ಅನ್ನು ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಥವಾ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯ 5 '-ಟರ್ಮಿನಲ್ ಡಿಫಾಸ್ಫರೈಸ್ ಮಾಡಲು ಸ್ವಯಂ-ಲಿಂಕ್ ಮಾಡುವುದನ್ನು ತಡೆಯಲು ಬಳಸಬಹುದು;
3. ಮೇಲಿನ ಡಿಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಥವಾ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ರೇಡಿಯೊ-ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಿದ ಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ಗಳಿಂದ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಬಹುದು (ಟಿ 4 ಪಾಲಿ-ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ ಕೈನೇಸ್ ಮೂಲಕ)
ರಾಸಾಯನಿಕ ರಚನೆ
ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ
| ಪರೀಕ್ಷಾ ವಸ್ತುಗಳು | ವಿಶೇಷಣಗಳು |
| ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆ | 5U/μL |
| ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ | ಪತ್ತೆಯಾಗಲಿಲ್ಲ |
| ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ | ಪತ್ತೆಯಾಗಲಿಲ್ಲ |
| ನಿಕ್ಕಿಂಗ್ ಚಟುವಟಿಕೆ | ಪತ್ತೆಯಾಗಲಿಲ್ಲ |
| RNase ಚಟುವಟಿಕೆ | ಪತ್ತೆಯಾಗಲಿಲ್ಲ |
| E.coli DNA | ≤1ನಕಲು/5U |
| ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್ | LAL-ಪರೀಕ್ಷೆ, ≤10EU/mg |
| ಶುದ್ಧತೆ | ≥95% |
ಸಾರಿಗೆ ಮತ್ತು ಸಂಗ್ರಹಣೆ
ಸಾರಿಗೆ:ಆಂಬಿಯೆಂಟ್
ಸಂಗ್ರಹಣೆ:2-8 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ
ಮರು ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆಜೀವನ:2 ವರ್ಷ
