BsaI ನಿರ್ಬಂಧ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್
ವಿವರಣೆ
BsaI ನಿರ್ಬಂಧದ ಕಿಣ್ವವು E.coli ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್ ಸ್ಫೇರಿಕಸ್ನಲ್ಲಿ BspQI ಜೀನ್ನಿಂದ ಎನ್ಕೋಡ್ ಮಾಡಲಾದ ಮರುಸಂಯೋಜಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ನಿಂದ ಪಡೆದ ಟೈಪ್ II ನಿರ್ಬಂಧದ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಆಗಿದೆ.ನಿರ್ಬಂಧದ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ಗಳನ್ನು ಜೀನ್ ಮ್ಯಾಪಿಂಗ್, ಕ್ಲೋನಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಇತರ ಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಈ ಕಿಣ್ವವು ಸಮರ್ಥ ಜೀನ್ ಲೀನಿಯರೈಸೇಶನ್ Bsa I, IIs ನಿರ್ಬಂಧದ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ನಿರ್ಬಂಧ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ಗಾಗಿ DNAಯನ್ನು ವೇಗವಾಗಿ ಕತ್ತರಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್ ಸ್ಟೀರೋಥರ್ಮೋಫಿಲಸ್ನಿಂದ ಅಬೀಜ ಸಂಯೋಜಿತ ಮತ್ತು ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ BsaI ಜೀನ್ ಅನ್ನು ಒಯ್ಯುವ ಮರುಸಂಯೋಜಕ E. ಕೊಲಿ ಸ್ಟ್ರೈನ್ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.ಇದು ಸ್ಥಳೀಯ ಕಿಣ್ವಗಳಂತೆಯೇ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಕ್ಷತ್ರದ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಅದರ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಅನುಕ್ರಮ ಮತ್ತು ಸೀಳು ಸ್ಥಳಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿವೆ:
5'······GGTCTC(N)······ ··3'
3'······CCAGAG(NNNNN)······5'
ರಾಸಾಯನಿಕ ರಚನೆ
ಉತ್ಪನ್ನ ಲಕ್ಷಣಗಳು
• ನಿರ್ಬಂಧದ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕಿಣ್ವಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
• ನಿಖರವಾದ "ಸ್ಕಾಲ್ಪೆಲ್" ಕತ್ತರಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಕಡಿಮೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ.
• BSA ವ್ಯವಸ್ಥೆ ಇಲ್ಲ, ಶಾಖದ ಮೂಲ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.
ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ
ಪರೀಕ್ಷಾ ವಸ್ತುಗಳು | ವಿಶೇಷಣಗಳು |
ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆ | 20 U/µL |
ಶುದ್ಧತೆ(SDS-PAGE) | ≥95% |
ರ್ನಾಸೆ | ಯಾವುದೂ ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ |
ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ DNase ಚಟುವಟಿಕೆ | ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ |
ಸ್ಟಾರ್ ಚಟುವಟಿಕೆ | ಪತ್ತೆಯಾಗಿಲ್ಲ |
ಬಂಧನ ಮತ್ತು ಪುನರಾವರ್ತನೆ | ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆಯ ನಂತರ, ಡಿಎನ್ಎ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು ಬಂಧಿಸಬಹುದು.ಮತ್ತು ಈ ಲಿಗೇಟೆಡ್ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು Bsal ನೊಂದಿಗೆ ಮರುಕಳಿಸಬಹುದು. |
ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್ಗಳು(LAL-ಪರೀಕ್ಷೆ) | ≤10 EU/mg |
E.Coli DNA | ≤1 ನಕಲು/2U |
ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ
ಶುದ್ಧತೆ ≥ 95%, DNase ಇಲ್ಲ, RNase ಚಟುವಟಿಕೆ, ಹೋಸ್ಟ್ DNA ಶೇಷ ≤ 100pg/mg, ಹೋಸ್ಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಶೇಷ ≤ -50ppm, ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್ ಶೇಷ ≤ 10EU/mg, ಯಾವುದೇ ಪ್ರೋಟಿಯೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯಿಲ್ಲ, ಕ್ರಿಮಿನಾಶಕ, ಮೈಕೋಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮುಕ್ತ
ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್
ಪಾಲಿ (A/T/C/G) ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ ರೇಖಾತ್ಮಕ DNA ತುಣುಕನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಅನ್ನು ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ;
ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಮೊದಲು ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ಲೀನಿಯರೈಸ್ ಮಾಡಿ;
ನಿರ್ಬಂಧ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ;
ಘಟಕದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ
ಒಂದು ಘಟಕವು 50 µL ನ ಒಟ್ಟು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಮಾಣದಲ್ಲಿ 37 ° C ನಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆಯಲ್ಲಿ 1 µg ಆಂತರಿಕ ನಿಯಂತ್ರಣ DNA ಯನ್ನು ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ ಎಂದು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಸಾರಿಗೆ ಮತ್ತು ಸಂಗ್ರಹಣೆ
ಸಾರಿಗೆ:-15 ° C ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ರವಾನಿಸಲಾಗಿದೆ
ಸಂಗ್ರಹಣೆ:-25~-15°C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ
ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾದ ಮರು ಪರೀಕ್ಷೆ ಜೀವನ:1 ವರ್ಷ