BspQI
BspQI ಅನ್ನು E. ಕೊಲಿಯಲ್ಲಿ ಮರುಸಂಯೋಜಿತವಾಗಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಬಹುದು ಅದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ
BspQI, IIs ನಿರ್ಬಂಧದ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ನಿರ್ಬಂಧದ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್, ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್ ಸ್ಫೇರಿಕಸ್‌ನಿಂದ ಅಬೀಜ ಸಂಯೋಜಿತ ಮತ್ತು ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ BspQI ಜನ್ ಅನ್ನು ಒಯ್ಯುವ ಮರುಸಂಯೋಜಕ E. ಕೊಲಿ ಸ್ಟ್ರೈನ್‌ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಅನುಕ್ರಮ ಮತ್ತು ಸೀಳು ಸೈಟ್‌ಗಳು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತಿವೆ:
5' · · · · GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG (NNNN) · · · · 5'
ಉತ್ಪನ್ನ ಲಕ್ಷಣಗಳು
1. ಹೆಚ್ಚಿನ ಚಟುವಟಿಕೆ, ವೇಗದ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ;
2. ಕಡಿಮೆ ನಕ್ಷತ್ರದ ಚಟುವಟಿಕೆ, "ಸ್ಕಾಲ್ಪೆಲ್" ನಂತಹ ನಿಖರವಾದ ಕತ್ತರಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸುವುದು;
3. BSA ಇಲ್ಲದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಣಿ ಮೂಲದ ಉಚಿತ;
ಮೆತಿಲೀಕರಣ ಸಂವೇದನೆ
Dನಾನು ಮೆತಿಲೀಕರಣ:ಸೂಕ್ಷ್ಮವಲ್ಲ;
Dಸೆಂ ಮೆತಿಲೀಕರಣ:ಸೂಕ್ಷ್ಮವಲ್ಲ;
ಸಿಪಿಜಿ ಮೆತಿಲೀಕರಣ:ಸೂಕ್ಷ್ಮವಲ್ಲ;
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ≤ 0℃ ರವಾನೆ ಮಾಡಬೇಕು;-25~- 15℃ ಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.
ಶೇಖರಣಾ ಬಫರ್
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM ಡಿಥಿಯೋಥ್ರೆಟಾಲ್, 500 µg/ml ರಿಕಾಂಬಿನೆಂಟ್ ಅಲ್ಬುಮಿನ್, 0. 1% ಟ್ರಿಶನ್ X- 100 ಮತ್ತು 50% ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ (pH 7.0 @ 25 ° C).
ಘಟಕದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ
ಒಂದು ಘಟಕವು 50 µL ನ ಒಟ್ಟು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಮಾಣದಲ್ಲಿ 50 ° C ನಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆಯಲ್ಲಿ 1µg ಆಂತರಿಕ ನಿಯಂತ್ರಣ DNA ಯನ್ನು ಜೀರ್ಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ ಎಂದು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ
ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪ್ಯೂರಿಟಿ ಅಸ್ಸೇ (SDS-PAGE):BspQI ನ ಶುದ್ಧತೆಯನ್ನು SDS-PAGE ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಿಂದ ≥95% ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗಿದೆ.
RNase:50℃ ನಲ್ಲಿ 4 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 1.6μg MS2 ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯೊಂದಿಗೆ 10U BspQI ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ನಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಂತೆ ಯಾವುದೇ ಅವನತಿಯನ್ನು ನೀಡುವುದಿಲ್ಲ.
ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ DNase ಚಟುವಟಿಕೆ:16 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 50℃ ನಲ್ಲಿ 1μg λ ಡಿಎನ್‌ಎಯೊಂದಿಗೆ 10U BspQI, 1ಗಂಟೆಗೆ 50℃ ನೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ನಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಿದಂತೆ ಯಾವುದೇ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ನೀಡುವುದಿಲ್ಲ.
ಬಂಧನ ಮತ್ತು ಪುನರಾವರ್ತನೆ:10U BspQI ಜೊತೆಗೆ 1 μg λDNA ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆಯ ನಂತರ, DNA ತುಣುಕುಗಳನ್ನು T4 DNA ಲಿಗೇಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ 16ºC ನಲ್ಲಿ ಬಂಧಿಸಬಹುದು.ಮತ್ತು ಈ ಲಿಗೇಟೆಡ್ ತುಣುಕುಗಳನ್ನು BspQI ನೊಂದಿಗೆ ಮರುಕಳಿಸಬಹುದು.
E. ಕೊಲಿ DNA: E. coli 16s rDNA-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ TaqMan qPCR ಪತ್ತೆಯು E.coli ಜೀನೋಮ್ ಶೇಷ ≤ 0.1pg/ul ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ.
ಹೋಸ್ಟ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಶೇಷ:≤ 50 ppm
ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್: LAL-ಪರೀಕ್ಷೆ, ಚೈನೀಸ್ ಫಾರ್ಮಾಕೊಪೋಯಾ IV 2020 ಆವೃತ್ತಿಯ ಪ್ರಕಾರ, ಜೆಲ್ ಮಿತಿ ಪರೀಕ್ಷಾ ವಿಧಾನ, ಸಾಮಾನ್ಯ ನಿಯಮ (1143).ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಎಂಡೋಟಾಕ್ಸಿನ್ ಅಂಶವು ≤10 EU/mg ಆಗಿರಬೇಕು.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ ಮತ್ತು ಷರತ್ತುಗಳು
| ಘಟಕ | ಸಂಪುಟ |
| BspQ I(10 U/μL) | 1 μL |
| ಡಿಎನ್ಎ | 1 μg |
| 10 x BspQ I ಬಫರ್ | 5 μL |
| dd H2O | 50 μL ವರೆಗೆ |
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು: 50℃, 1~ 16 ಗಂ.
ಶಾಖ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆ: 20 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 80 ° C.
ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ ಮತ್ತು ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಉತ್ತಮವಾದ ಕಿಣ್ವ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಒದಗಿಸಬಹುದು, ಇದು ಉಲ್ಲೇಖಕ್ಕಾಗಿ ಮಾತ್ರ, ದಯವಿಟ್ಟು ವಿವರಗಳಿಗಾಗಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ನೋಡಿ.
ಉತ್ಪನ್ನ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್
ನಿರ್ಬಂಧ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಜೀರ್ಣಕ್ರಿಯೆ, ಕ್ಷಿಪ್ರ ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ.
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
1. ಕಿಣ್ವದ ಪರಿಮಾಣ ≤ 1/10 ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಮಾಣ.
2. ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯು 5% ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರುವಾಗ ಸ್ಟಾರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಸಂಭವಿಸಬಹುದು.
3. ಶಿಫಾರಸ್ಸು ಮಾಡಿದ ಅನುಪಾತಕ್ಕಿಂತ ಕೆಳಗಿರುವ ತಲಾಧಾರವು ಸೀಳುವಿಕೆಯ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಸಂಭವಿಸಬಹುದು.
