ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಒಂದು ಹಂತ RT-qPCR ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್
ವಿವರಣೆ
ಬೆಕ್ಕು ಸಂಖ್ಯೆ: HCR5141A
ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಒನ್ ಸ್ಟೆಪ್ ಆರ್ಟಿ-ಕ್ಯೂಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್ ಎನ್ನುವುದು ಆರ್ಎನ್ಎಯನ್ನು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಆಗಿ ಆಧರಿಸಿ ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಿಟ್ ಆಗಿದೆ.ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ, ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಮತ್ತು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಅನ್ನು ಅದೇ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಬಫರ್ ಮತ್ತು ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣದ ವಿಶಿಷ್ಟ ವಿನ್ಯಾಸವನ್ನು ಒಂದು ಹಂತದ ಲೈಫೈಲೈಸ್ಡ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು.ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ಹಾಟ್ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಮೊದಲ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ cDNA ಯ ಸಮರ್ಥ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಕಿಟ್ ಶಾಖ-ನಿರೋಧಕ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ.ಇದು ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಬಫರ್, ಕಿಣ್ವಗಳ ಮಿಶ್ರಣ ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಪಿಸಿಆರ್ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವ ಅಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಬಹು qPCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಗಿದೆ, ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಪಡಿಸುವಾಗ ಬಹು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಘಟಕಗಳು
ಹೆಸರು |
1. ಲಿಯೋ-ಬಫರ್ |
2. ಲಿಯೋ-ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ |
3. ಲಿಯೋ ರಕ್ಷಕ |
ಸಾರಿಗೆ ಸ್ಥಿತಿಅಯಾನು
ಎ: ಲಿಯೋ-ಬಫರ್ ಮತ್ತು ರಕ್ಷಣಾತ್ಮಕ: -25~-15℃, ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನವು 1 ವರ್ಷ.
ಬಿ: ಲಿಯೋ-ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ, 2-8 ℃, ಶೆಲ್ಫ್ ಜೀವನವು 6 ತಿಂಗಳುಗಳು.
ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗೆ ಸೂಚನೆ
1. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ (ಉದಾಹರಣೆಗೆ 25μL ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ)
ಘಟಕಗಳು | ಪರಿಮಾಣ (μL) | ಅಂತಿಮ ಏಕಾಗ್ರತೆ |
ಲಿಯೋ-ಬಫರ್ | 6 | 1* |
ಲಿಯೋ-ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ | 1 | - |
ಲಿಯೋ-ಪ್ರೊಟೆಕ್ಟರ್ | 8 | - |
ಪ್ರೈಮರ್ ಮಿಕ್ಸ್ (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
ಪ್ರೋಬ್ ಮಿಕ್ಸ್ (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
ಆರ್ಎನ್ಎ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ | 5 | - |
DEPC H2O | 25ರ ವರೆಗೆ | - |
2. ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
1) ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಹಂತ | ತಾಪಮಾನ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್ | |
1 | ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನ | 50°Ca | 10 ನಿಮಿಷ | 1 |
2 | ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95°C | 5ನಿಮಿಷ | 1 |
3 | ವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ | 95°C | 15 ಸೆ | 45 ಚಕ್ರಗಳು |
60°Cb | 30 ಸೆc |
2) ವೇಗದ ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
| ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಹಂತ | ತಾಪಮಾನ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್ |
1 | ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನ | 50°Ca | 2ನಿಮಿ | 1 |
2 | ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95°C | 2ಸೆಕೆಂಡು | 1 |
3 | ವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ | 95°C | 1 ಸೆಕೆಂಡ್ |
45 ಚಕ್ರಗಳು |
60°Cb | 13 ಸೆc |
ಸೂಚನೆ:
a) ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ: ತಾಪಮಾನವು 10-15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 42 ° C ಅಥವಾ 50 ° C ಅನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು.
b) ವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ: ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಿದ ಪ್ರೈಮರ್ಗಳ Tm ಮೌಲ್ಯಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಸಿ)ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸಂಕೇತ ಸ್ವಾಧೀನಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆ: ದಯವಿಟ್ಟು ಅಗತ್ಯತೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ವಿಧಾನವನ್ನು ಹೊಂದಿಸಿವಾದ್ಯ ಕೈಪಿಡಿ.
ತಾಂತ್ರಿಕ ಮಾಹಿತಿ/ವಿಶೇಷತೆಗಳು
ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ | ಅಂತರ್ನಿರ್ಮಿತ ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ |
ಪತ್ತೆ ವಿಧಾನ | ಪ್ರೈಮರ್-ಪ್ರೋಬ್ ಪತ್ತೆ |
ಪಿಸಿಆರ್ ವಿಧಾನ | ಒಂದು ಹಂತ RT-qPCR |
ಮಾದರಿಯ ಪ್ರಕಾರ | ಆರ್ಎನ್ಎ |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
1. ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಸಂಶೋಧನಾ ಬಳಕೆಗೆ ಮಾತ್ರ.
2. ನಿಮ್ಮ ಆರೋಗ್ಯ ಮತ್ತು ಸುರಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ದಯವಿಟ್ಟು ಅಗತ್ಯವಾದ PPE, ಅಂತಹ ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್ ಮತ್ತು ಕೈಗವಸುಗಳನ್ನು ಧರಿಸಿ!