ರ್ನಾಸ್ ಎ
ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ A (RNaseA) ಸುಮಾರು 13.7 kDa ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕದೊಂದಿಗೆ 4 ಡೈಸಲ್ಫೈಡ್ ಬಂಧಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಏಕ-ತಂತು ಪಾಲಿಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಆಗಿದೆ.RNase A ಎಂಬುದು ಎಂಡೋರಿಬೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಆಗಿದ್ದು ಅದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ C ಮತ್ತು U ಶೇಷಗಳಲ್ಲಿ ಏಕ-ಎಳೆಯ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಕುಗ್ಗಿಸುತ್ತದೆ.ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್‌ನ 5′-ರೈಬೋಸ್ ಮತ್ತು ಪಕ್ಕದ ಪಿರಿಮಿಡಿನ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟೈಡ್‌ನ 3′-ರೈಬೋಸ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಗುಂಪಿನಿಂದ ರೂಪುಗೊಂಡ ಫಾಸ್ಫೋಡೈಸ್ಟರ್ ಬಂಧವನ್ನು ಸೀಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದ 2, 3′-ಸೈಕ್ಲಿಕ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ಗಳು ಹೈಡ್ರೊಲೈಜ್ 3 ಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ′ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಸೈಡ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್‌ಗಳು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ pG-pG-pC-pA-pG ಅನ್ನು RNase A ನಿಂದ ಸೀಳಲಾಗುತ್ತದೆ pG-pG-pCp ಮತ್ತು A-PG).RNase A ಏಕ-ಎಳೆಯ RNAಯನ್ನು ಸೀಳುವಲ್ಲಿ ಅತ್ಯಂತ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿದೆ.ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾದ ಕೆಲಸದ ಸಾಂದ್ರತೆಯು 1-100μG/mL, ವಿವಿಧ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.ಕಡಿಮೆ ಉಪ್ಪಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು (0-100 mM NaCl) RNA-DNA ಹೈಬ್ರಿಡೈಸೇಶನ್‌ನಿಂದ ರಚಿಸಲಾದ ಏಕ-ತಂತಿಯ RNA, ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ RNA ಮತ್ತು RNA ಸರಪಳಿಗಳನ್ನು ಕತ್ತರಿಸಲು ಬಳಸಬಹುದು.ಆದಾಗ್ಯೂ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಉಪ್ಪಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯಲ್ಲಿ (≥0.3 M), RNase A ಮಾತ್ರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಏಕ-ತಂತಿಯ RNA ಅನ್ನು ಸೀಳುತ್ತದೆ.
ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಥವಾ ಜೆನೊಮಿಕ್ ಡಿಎನ್‌ಎ ತಯಾರಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಆರ್ನೇಸ್ ಎ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತಯಾರಿಕೆಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಡಿನೇಸ್ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರಲಿ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲದಿರಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮೇಲೆ ಸುಲಭವಾಗಿ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಬಹುದು.DNase ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ನೀರಿನ ಸ್ನಾನದಲ್ಲಿ ಕುದಿಯುವ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಬಹುದು.ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು DNase ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟಿಯೇಸ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಶಾಖ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುವುದಿಲ್ಲ.ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, RNase ರಕ್ಷಣೆ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಮತ್ತು RNA ಅನುಕ್ರಮ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಂತಹ ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರದ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಈ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಸಹ ಬಳಸಬಹುದು.
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು -25～-15℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು, ಇದು 2 ವರ್ಷಗಳವರೆಗೆ ಮಾನ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
ಸೂಚನೆಗಳು
RNase A ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ.ಇದನ್ನು ಸಹ ತಯಾರಿಸಬಹುದುಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಅಥವಾ ಉಲ್ಲೇಖ ಸಾಹಿತ್ಯದಲ್ಲಿನ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ವಿಧಾನಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಇತರ ವಿಧಾನಗಳು (ಉದಾಹರಣೆಗೆನೇರವಾಗಿ 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ಅಥವಾ Tris-NaCl ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಕರಗುತ್ತದೆ)
1. RNase A ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಹಾರವನ್ನು 10 mg/mL ತಯಾರಿಸಲು 10 mM ಸೋಡಿಯಂ ಅಸಿಟೇಟ್ (pH 5.2) ಬಳಸಿ
2. 15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 100 ℃ ನಲ್ಲಿ ಬಿಸಿ ಮಾಡುವುದು
3. ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ ತಂಪಾಗಿಸಿ, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) 1/10 ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ಅದರ pH ಅನ್ನು 7.4 ಗೆ ಹೊಂದಿಸಿ (ಇದಕ್ಕಾಗಿಉದಾಹರಣೆಗೆ, 500 ಮಿಲಿ 10g/ml RNase ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಹಾರ 1M Tris-HCL, PH7.4) ಸೇರಿಸಿ
4. ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿದ ಸಂಗ್ರಹಣೆಗಾಗಿ -20℃ ನಲ್ಲಿ ಉಪ-ಪ್ಯಾಕೇಜ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ಇದು 2 ವರ್ಷಗಳವರೆಗೆ ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
[ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು]: ತಟಸ್ಥ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ RNaseA ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಕುದಿಸಿದಾಗ, RNase ಮಳೆಯು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ;ಕಡಿಮೆ pH ನಲ್ಲಿ ಅದನ್ನು ಕುದಿಸಿ, ಮತ್ತು ಮಳೆಯಿದ್ದರೆ, ಅದನ್ನು ಗಮನಿಸಬಹುದು, ಇದು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕಲ್ಮಶಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ ಉಂಟಾಗಬಹುದು.ಕುದಿಯುವ ನಂತರ ಕೆಸರು ಕಂಡುಬಂದರೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ವೇಗದ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ (13000rpm) ಮೂಲಕ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಬಹುದು ಮತ್ತು ನಂತರ ಘನೀಕರಿಸುವ ಶೇಖರಣೆಗಾಗಿ ಉಪ-ಪ್ಯಾಕ್ ಮಾಡಬಹುದು.
ಉತ್ಪನ್ನ ಮಾಹಿತಿ
| ಸಮಾನಾರ್ಥಕ ಪದಗಳು | ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ I;ಪ್ಯಾಂಕ್ರಿಯಾಟಿಕ್ ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್;ರೈಬೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ 3'-ಪಿರಿಮಿಡ್ನೂಲಿಗೋನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೋಟಿಡೋಹೈಡ್ರೋಲೇಸ್;Rnase A;ಎಂಡೋರಿಬೊನ್ಯುಲ್ಸೀಸ್ I |
| ಸಿಎಎಸ್ ನಂ. | 9001-99-4 |
| ಗೋಚರತೆ | ಬಿಳಿ ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ಡ್ ಪುಡಿ |
| ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕ | ~ 13.7kDa (ಅಮಿನೋ ಆಮ್ಲ ಅನುಕ್ರಮ) |
| ಪಿಎಚ್ ಮೌಲ್ಯ | 7.6 (ಚಟುವಟಿಕೆ ಶ್ರೇಣಿ 6-10) |
| ಸೂಕ್ತವಾದ ತಾಪಮಾನ | 60℃ (ಚಟುವಟಿಕೆ ವ್ಯಾಪ್ತಿ 15-70℃) |
| ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಏಜೆಂಟ್ | Na2+.ಕೆ+ |
| ಪ್ರತಿಬಂಧಕ | ಆರ್ನೇಸ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್ |
| ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ವಿಧಾನ | ತಾಪನದಿಂದ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ, ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ |
| ಮೂಲ | ಗೋವಿನ |
| ಕರಗುವಿಕೆ | ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕರಗುತ್ತದೆ (10mg/ml) |
| ಒಣಗಿದ ಮೇಲೆ ನಷ್ಟ | ≤5.0% |
| ಕಿಣ್ವ ಚಟುವಟಿಕೆ | ≥60 ಕುನಿಟ್ಜ್ ಘಟಕಗಳು/ಮಿಗ್ರಾಂ |
| ಐಸೊಎಲೆಕ್ಟ್ರಿಕ್ ಪಾಯಿಂಟ್ | 9.6 |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
ನಿಮ್ಮ ಸುರಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಆರೋಗ್ಯಕ್ಕಾಗಿ, ದಯವಿಟ್ಟು ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಾಗಿ ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಕೈಗವಸುಗಳನ್ನು ಧರಿಸಿ.
