ಒಂದು ಹಂತದ ವೇಗದ RT-qPCR ಪ್ರೋಬ್ ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್-UNG
ಬೆಕ್ಕು ಸಂಖ್ಯೆ: HCR5143A
ಒನ್ ಸ್ಟೆಪ್ RT-qPCR ಪ್ರೋಬ್ ಕಿಟ್ (ಫಾಸ್ಟ್ ಫಾರ್) ಪ್ರೋಬ್-ಆಧಾರಿತ RT-qPCR ಫಾಸ್ಟ್ ಡಿಟೆಕ್ಷನ್ ಕಿಟ್ ಆಗಿದ್ದು, ಆರ್ಎನ್ಎ ಅನ್ನು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ನಂತೆ (ಆರ್ಎನ್ಎ ವೈರಸ್ನಂತಹ) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಿಂಗಲ್-ಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಅಥವಾ ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಪಿಸಿಆರ್ಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಹೊಸ ಪೀಳಿಗೆಯ ಪ್ರತಿಕಾಯ-ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಮತ್ತು ಒಂದು-ಹಂತದ ಮೀಸಲಾದ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ, ಕ್ಷಿಪ್ರ ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಬಫರ್ ಜೊತೆಗೆ ವೇಗವಾದ ವರ್ಧನೆಯ ವೇಗ, ಹೆಚ್ಚಿನ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.ಇದು ಕಡಿಮೆ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಮಾದರಿಗಳ ಏಕ-ಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಮಲ್ಟಿಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಎರಡರಲ್ಲೂ ಸಮತೋಲಿತ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ.
ಘಟಕಗಳು
1. 5×RT-qPCR ಬಫರ್ (U+)
2. ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ (U+)
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು:
ಎ.5×RT-qPCR ಬಫರ್ (U+) dNTP ಮತ್ತು Mg ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ2+;
ಬಿ.ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ (U+) ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್, ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟ್ಯಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್, ಆರ್ನೇಸ್ ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್ ಮತ್ತು ಯುಡಿಜಿ;
ಸಿ.RNase-ಮುಕ್ತ ಸಲಹೆಗಳು, EP ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಇತ್ಯಾದಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ.
ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು, 5×RT-qPCR ಬಫರ್ (U+) ಅನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.ಕರಗಿದ ನಂತರ ಯಾವುದೇ ಮಳೆಯಿದ್ದರೆ, ಬಫರ್ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ ಮರಳಲು ನಿರೀಕ್ಷಿಸಿ, ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಕರಗಿಸಿ, ತದನಂತರ ಅವುಗಳನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸಿ.
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಡ್ರೈ ಐಸ್ನೊಂದಿಗೆ ರವಾನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 1 ವರ್ಷಕ್ಕೆ -25~-15℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.
ಸೂಚನೆಗಳು
1. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ
ಘಟಕಗಳು | ಪರಿಮಾಣ (20 μL ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ) |
2 × RT-qPCR ಬಫರ್ | 4μL |
ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ (U+) | 0.8μL |
ಪ್ರೈಮರ್ ಫಾರ್ವರ್ಡ್ | 0.1~ 1.0μM |
ಪ್ರೈಮರ್ ರಿವರ್ಸ್ | 0.1~ 1.0μM |
ತಕ್ಮಾನ್ ಪ್ರೋಬ್ | 0.05~0.25μM |
ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ | X μL |
RNase-ಮುಕ್ತ ನೀರು | 25μL ವರೆಗೆ |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು: ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಮಾಣವು 10-50μL ಆಗಿದೆ.
2. ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ (ಎಸ್ಟಂಡರ್ಡ್)
ಸೈಕಲ್ ಹಂತ | ತಾಪ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್ಗಳು |
ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ | 55 ℃ | 10 ನಿಮಿಷ | 1 |
ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95 ℃ | 30 ಸೆ | 1 |
ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95 ℃ | 10 ಸೆ | 45 |
ಅನೆಲಿಂಗ್/ವಿಸ್ತರಣೆ | 60 ℃ | 30 ಸೆ |
ಸೈಕ್ಲಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ (ವೇಗವಾಗಿ) ಸೈಕಲ್ ಹಂತ |
ತಾಪ |
ಸಮಯ |
ಸೈಕಲ್ಗಳು |
ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ | 55 ℃ | 5 ನಿಮಿಷ | 1 |
ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95 ℃ | 5 ಸೆ | 1 |
ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95 ℃ | 3 ಸೆ | 43 |
ಅನೆಲಿಂಗ್/ವಿಸ್ತರಣೆ | 60 ℃ | 10 ಸೆ |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು:
ಎ.ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ತಾಪಮಾನವು 50℃ ರಿಂದ 60℃ ನಡುವೆ ಇರುತ್ತದೆ, ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದರಿಂದ ಸಂಕೀರ್ಣ ರಚನೆಗಳು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ CG ವಿಷಯ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ಗಳನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ;
ಬಿ.ಪ್ರೈಮರ್ನ Tm ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಆಧರಿಸಿ ಸೂಕ್ತವಾದ ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸಬೇಕಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ನೈಜ ಸಮಯದ PCR ಉಪಕರಣದ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಸಂಗ್ರಹಕ್ಕಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಸಮಯವನ್ನು ಆಯ್ಕೆಮಾಡಿ.
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
ನಿಮ್ಮ ಆರೋಗ್ಯ ಮತ್ತು ಸುರಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ದಯವಿಟ್ಟು ಅಗತ್ಯವಾದ ಪಿಪಿಇ, ಅಂತಹ ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್ ಮತ್ತು ಕೈಗವಸುಗಳನ್ನು ಧರಿಸಿ!