5×ನಿಯೋಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಫಾಸ್ಟ್ RT-qPCR ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್ ಜೊತೆಗೆ-UNG

ಬೆಕ್ಕು ಸಂಖ್ಯೆ: HCB5142A

ನಿಯೋಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಫಾಸ್ಟ್ ಆರ್‌ಟಿ ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್-ಯುಎನ್‌ಜಿ (ಪ್ರೋಬ್ ಕ್ಯೂಆರ್‌ಟಿ-ಪಿಸಿಆರ್) ಒಂದು-ಹಂತದ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಮತ್ತು ಕ್ವಾಂಟಿಟೇಟಿವ್ ಪಿಸಿಆರ್ (qRT-PCR) ಗೆ ಸೂಕ್ತವಾದ ಒಂದು-ಟ್ಯೂಬ್ ಪ್ರೋಬ್ ಆಧಾರಿತ ಮಿಶ್ರಣವಾಗಿದೆ.ಇದು ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಬ್‌ಗಳ ಪೂರ್ವ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲ ಶೇಖರಣೆಯ ನಂತರ ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತದೆ.ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಟ್ಯೂಬ್ ತೆರೆಯುವಿಕೆ/ಪೈಪೆಟ್ ಮಾಡುವ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯಿಲ್ಲದೆಯೇ ಪರೀಕ್ಷಿಸಬೇಕಾದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಬಳಸುವಾಗ ನೇರವಾಗಿ ಸೇರಿಸಬಹುದು.ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಘಟಕಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಹಾಟ್-ಸ್ಟಾರ್ಟ್ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್, M-MLV, ಶಾಖ-ಲೇಬಲ್ ಯುರಾಸಿಲ್ DNA ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲೇಸ್ (TS-UNG), RNase ಇನ್ಹಿಬಿಟರ್, MgCl₂, dNTP ಗಳು (dTTP ಬದಲಿಗೆ dUTP ಜೊತೆಗೆ), ಮತ್ತು ಸ್ಟೆಬಿಲೈಜರ್‌ಗಳು.ತಳೀಯವಾಗಿ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಕ್ಷಿಪ್ರ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್‌ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ, 20-40 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಪಿಸಿಆರ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಅನ್ನು ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿದೆ.ಈ ಕಾರಕವು ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಕಿಣ್ವ ಮತ್ತು UNG ಕಿಣ್ವದ ಮಿಶ್ರ ಕಿಣ್ವಗಳೊಂದಿಗೆ qPCR ಗಾಗಿ ವಿಶೇಷ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ.ಆದ್ದರಿಂದ, ಇದು ಗುರಿ ಜೀನ್‌ಗಳ ಉತ್ತಮ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಬಹುದು ಮತ್ತು PCR ಉಳಿಕೆ ಮತ್ತು ಏರೋಸಾಲ್ ಮಾಲಿನ್ಯದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ತಪ್ಪು ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ.ಈ ಕಾರಕವು ಅಪ್ಲೈಡ್ ಬಯೋಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್, ಎಪ್ಪೆಂಡಾರ್ಫ್, ಬಯೋ-ರಾಡ್ ಮತ್ತು ರೋಚೆಯಂತಹ ತಯಾರಕರಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಉಪಕರಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.

ಘಟಕ

1.25×ನಿಯೋಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಫಾಸ್ಟ್ RTase/UNG ಮಿಕ್ಸ್

2.5×ನಿಯೋಸ್ಕ್ರಿಪ್ಟ್ ಫಾಸ್ಟ್ ಆರ್ಟಿ ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್ ಬಫರ್ (dUTP)

ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು

ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಶೇಖರಣೆಗಾಗಿ ಎಲ್ಲಾ ಘಟಕಗಳನ್ನು -20℃ ಮತ್ತು 3 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ 4℃ ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಬೇಕು.ದಯವಿಟ್ಟು ಬಳಸುವ ಮೊದಲು ಕರಗಿಸಿ ಮತ್ತು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ನಂತರ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.ಆಗಾಗ್ಗೆ ಫ್ರೀಜ್-ಲೇಪವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ.

qRT-PCR ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ತಯಾರಿ

1) a. ಪ್ರೈಮರ್‌ನ ಅಂತಿಮ ಸಾಂದ್ರತೆಯು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 0.2μM ಆಗಿದೆ.ಉತ್ತಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗಾಗಿ, ಪ್ರೈಮರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು 0.2-1μM ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಹೊಂದುವಂತೆ ಮಾಡಬಹುದು.ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ, ತನಿಖೆಯ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು 0.1-0.3μM ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಹೊಂದುವಂತೆ ಮಾಡಬಹುದು.

2) b.ವೇಗದ ಪಿಸಿಆರ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸುವಾಗ, ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರೋಬ್‌ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದರಿಂದ ಉತ್ತಮ ವರ್ಧನೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಉಂಟಾಗಬಹುದು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಅದಕ್ಕೆ ತಕ್ಕಂತೆ ಹೊಂದುವಂತೆ ಮಾಡಬೇಕು.

3) ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರಕಾರದ ಮಾದರಿಗಳು ವಿವಿಧ ಪ್ರಕಾರಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿರೋಧಕದ ವಿಷಯವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಗುರಿ ಜೀನ್‌ನ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ನಕಲಿಸುತ್ತವೆ.ಮಾದರಿ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ನೈಜ ಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ ಪರಿಗಣಿಸಬೇಕು.ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೆ, ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್-ಮುಕ್ತ ನೀರು ಅಥವಾ TE ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಮಾದರಿಯನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.

ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಸಿಷರತ್ತುಗಳು

ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ

1.ಕಾರ್ಯ ಪತ್ತೆ: qPCR ನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ ಮತ್ತು ಪುನರಾವರ್ತನೆ.

2.ಯಾವುದೇ ಬಾಹ್ಯ ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ಇಲ್ಲ: ಬಾಹ್ಯ ಎಂಡೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಮತ್ತು ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಮಾಲಿನ್ಯವಿಲ್ಲ.

ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು

1.ಕ್ಷಿಪ್ರ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್‌ನ ವರ್ಧನೆಯ ದರವು 1kb/10s ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿಲ್ಲ.ವಿಭಿನ್ನ PCR ಉಪಕರಣಗಳು ವಿಭಿನ್ನ ತಾಪನ ಮತ್ತು ತಂಪಾಗಿಸುವ ವೇಗಗಳು, ತಾಪಮಾನ ನಿಯಂತ್ರಣ ವಿಧಾನಗಳು ಮತ್ತು ಉಷ್ಣ ವಾಹಕತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ, ಹೀಗಾಗಿ ನಿಮ್ಮ ಪ್ರೈಮರ್/ಪ್ರೋಬ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಆಪ್ಟಿಮೈಸೇಶನ್ ಮತ್ತು ನಿಮ್ಮ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವೇಗದ PCR ಉಪಕರಣದೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜನೆಯೊಂದಿಗೆ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ವಿಧಾನವನ್ನು ಅತ್ಯಗತ್ಯ.

2.ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ವ್ಯಾಪಕವಾದ ಅನ್ವಯವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಆಣ್ವಿಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯಕ್ಕೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.ಮೂರು-ಹಂತದ PCR ವಿಧಾನವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳಿಗೆ ಅಥವಾ 200 bp ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಉದ್ದವಾದ ತುಣುಕುಗಳ ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.

3.ವಿಭಿನ್ನ ಆಂಪ್ಲಿಕಾನ್‌ಗಳು ಡಿಯುಟಿಪಿಯ ವಿಭಿನ್ನ ಬಳಕೆಯ ದಕ್ಷತೆ ಮತ್ತು ಯುಎನ್‌ಜಿಗೆ ವಿಭಿನ್ನ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದರಿಂದ, ಯುಎನ್‌ಜಿ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಬಳಸುವಾಗ ಪತ್ತೆ ಸಂವೇದನೆ ಕಡಿಮೆಯಾದರೆ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ ಮಾಡಬೇಕು.ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೆ ತಾಂತ್ರಿಕ ಬೆಂಬಲಕ್ಕಾಗಿ ನಮ್ಮನ್ನು ಸಂಪರ್ಕಿಸಿ.

4.ಕ್ಯಾರಿಓವರ್ ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು, ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ಮೀಸಲಾದ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರದೇಶ ಮತ್ತು ಪೈಪೆಟ್ ಅಗತ್ಯವಿದೆ.ಕೈಗವಸುಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿ ಮತ್ತು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಬದಲಿಸಿ ಮತ್ತು ವರ್ಧನೆಯ ನಂತರ PCR ಟ್ಯೂಬ್ ಅನ್ನು ತೆರೆಯಬೇಡಿ.