Bst 2.0 DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ (ಗ್ಲಿಸರಾಲ್ ಮುಕ್ತ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಾಂದ್ರತೆ)
Bst DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ V2 ಅನ್ನು ಬ್ಯಾಸಿಲಸ್ ಸ್ಟೀರೋಥರ್ಮೋಫಿಲಸ್ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ I ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ, ಇದು 5′→3′ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಬಲವಾದ ಚೈನ್ ರಿಪ್ಲೇಸ್ಮೆಂಟ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಆದರೆ 5′→3′ ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯಿಲ್ಲ.Bst DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ V2 ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್-ಡಿಸ್ಪ್ಲೇಸ್‌ಮೆಂಟ್, ಐಸೋಥರ್ಮಲ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ LAMP (ಲೂಪ್ ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಐಸೊಥರ್ಮಲ್ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್) ಮತ್ತು ಕ್ಷಿಪ್ರ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.ಈ ಬಿಎಸ್‌ಟಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ವಿ2 ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಇದರಿಂದ ಅದನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸಬಹುದು, ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಈ ಆವೃತ್ತಿಯು lyophilized ಎಂದು.ಇದರ ಜೊತೆಗೆ, ಇದು ಎತ್ತರದ ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ತನ್ನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಹೀಗಾಗಿ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಹಂತದ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುತ್ತದೆ.
ಘಟಕಗಳು
| ಘಟಕ | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ V2 (ಗ್ಲಿಸರಾಲ್-ಮುಕ್ತ) (32U/μL) | 0.05 ಮಿ.ಲೀ | 0.25 ಮಿ.ಲೀ | 2.5 ಮಿ.ಲೀ |
| 10×HC Bst V2 ಬಫರ್ | 1.5 ಮಿ.ಲೀ | 2×1.5 ಮಿಲಿ | 3×10 ಮಿಲಿ |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 ಮಿ.ಲೀ | 2×1.5 ಮಿಲಿ | 2×10 ಮಿಲಿ |
ಅರ್ಜಿಗಳನ್ನು
1.LAMP ಐಸೊಥರ್ಮಲ್ ವರ್ಧನೆ
2.ಡಿಎನ್ಎ ಸ್ಟ್ರಾಂಡ್ ಏಕ ಸ್ಥಳಾಂತರದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ
3.ಹೆಚ್ಚಿನ GC ಜೀನ್ ಅನುಕ್ರಮ
4.ನ್ಯಾನೊಗ್ರಾಮ್ ಮಟ್ಟದ DNA ಅನುಕ್ರಮ.
ಶೇಖರಣಾ ಸ್ಥಿತಿ
0 ° C ಗಿಂತ ಕಡಿಮೆ ಸಾರಿಗೆ ಮತ್ತು -25 ° C ~ -15 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಘಟಕದ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ
ಒಂದು ಘಟಕವನ್ನು 65 ° C ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳಲ್ಲಿ ಆಮ್ಲ ಕರಗದ ವಸ್ತುವಿನೊಳಗೆ 25 nmol dNTP ಅನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸುವ ಕಿಣ್ವದ ಪ್ರಮಾಣ ಎಂದು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಲ್ಯಾಂಪ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ
| ಘಟಕಗಳು | 25 μLವ್ಯವಸ್ಥೆ |
| 10×HC Bst V2 ಬಫರ್ | 2.5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 μL |
| dNTP ಗಳು (10mM ಪ್ರತಿ) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 ಹಸಿರು (25×)a | 1.0 μL |
| ಪ್ರೈಮರ್ ಮಿಶ್ರಣb | 6 μL |
| Bst DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ V2 (ಗ್ಲಿಸರಾಲ್-ಮುಕ್ತ) (32 U/uL) | 0.25 μL |
| ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ | × μL |
| ddH₂O | 25 μL ವರೆಗೆ |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು:
1) ಎ.SYTOTM 16 ಹಸಿರು (25×): ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಗತ್ಯಗಳ ಪ್ರಕಾರ, ಇತರ ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ಬದಲಿಯಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು;
2) ಬಿ.ಪ್ರೈಮರ್ ಮಿಶ್ರಣ: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB ಮತ್ತು ಇತರ ಸಂಪುಟಗಳನ್ನು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮತ್ತು ಸ್ಥಿತಿ
1 × HC Bst V2 ಬಫರ್, ಕಾವು ತಾಪಮಾನವು 60 ° C ಮತ್ತು 65 ° C ನಡುವೆ ಇರುತ್ತದೆ.
ಶಾಖ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆ
80 ° C, 20 ನಿಮಿಷಗಳು.
