ಮಾದರಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಕಾರಕ
ಮಾದರಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಕಾರಕವು ಆಣ್ವಿಕ POCT ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ಸನ್ನಿವೇಶಗಳಿಗಾಗಿ ಆಗಿದೆ.ನೇರ ವರ್ಧನೆಯ LAMP ಮತ್ತು ನೇರ ವರ್ಧನೆಯ PCR ಎರಡು ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಿಗೆ, ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ.ಮಾದರಿಯ ಕಚ್ಚಾ ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ವರ್ಧಿಸಬಹುದು, ಗುರಿ ಜೀನ್ ಅನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದು, ಮಾದರಿ ಪತ್ತೆ ಸಮಯವನ್ನು ಇನ್ನಷ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು, ಇದು ಆಣ್ವಿಕ POCT ಯ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳಿಗೆ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುತ್ತದೆ.ಇದು ಮೂಗಿನ ಸ್ವೇಬ್‌ಗಳು, ಗಂಟಲು ಸ್ವೇಬ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಮಾದರಿ ಪ್ರಕಾರಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ನೈಜ-ಸಮಯದ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಅಥವಾ LAMP ಪತ್ತೆಗಾಗಿ ನೇರವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು, ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣವಾದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಳಿಲ್ಲದೆ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ಹೊರತೆಗೆಯುವ ವಿಧಾನಗಳಂತೆಯೇ ಅದೇ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಸಾಧಿಸಬಹುದು.
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಸಾಗಿಸಿ ಮತ್ತು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.
ಗುಣಮಟ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಣ
ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪತ್ತೆ - ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ qPCR: 800μl ಮಾದರಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಕಾರಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ವರ್ಧಿಸಲಾಗಿದೆ
1000 ಪ್ರತಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಾದಂಬರಿ ಸೂಡೊವೈರಸ್, ಒಂದು ಮೂಗಿನ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಮಾದರಿ, ಇದೇ ರೀತಿಯ ವರ್ಧನೆ ವಕ್ರಾಕೃತಿಗಳು ಮತ್ತು± 0.5 Ct ಒಳಗೆ ΔCt ಮೌಲ್ಯಗಳು.
ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನres
1. 800 μl ಮಾದರಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಕಾರಕವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ ಮತ್ತು ಲೈಸಿಸ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು 1.5 mL ಮಾದರಿ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ ಹರಡಿ
2. ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಮೂಗಿನ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಅಥವಾ ಗಂಟಲಿನ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ; ಮೂಗಿನ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಮಾದರಿ ವಿಧಾನ: ಸ್ಟೆರೈಲ್ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಂಡು ಮೂಗಿನ ಹೊಳ್ಳೆಗಳಿಗೆ ಹಾಕಿ, ನಿಧಾನವಾಗಿ ಸುಮಾರು 1.5 ಸೆಂ.ಮೀ ಆಳಕ್ಕೆ ಮುನ್ನಡೆಯಿರಿ, ಮೂಗಿನ ಲೋಳೆಪೊರೆಯ ವಿರುದ್ಧ 15 ಸೆಕೆಂಡುಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ ನಿಧಾನವಾಗಿ 4 ಬಾರಿ ತಿರುಗಿಸಿ. , ನಂತರ ಅದೇ swab. ಗಂಟಲು ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಮಾದರಿ ವಿಧಾನದೊಂದಿಗೆ ಇತರ ಮೂಗಿನ ಕುಹರದ ಅದೇ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಯನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಿ: ಬರಡಾದ ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ತೆಗೆದುಕೊಂಡು ನಿಧಾನವಾಗಿ, ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಫಾರಂಜಿಲ್ ಟಾನ್ಸಿಲ್ ಮತ್ತು ಹಿಂಭಾಗದ ಗಂಟಲಕುಳಿ ಗೋಡೆಯ 3 ಬಾರಿ ಅಳಿಸಿ.
3.ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಅನ್ನು ತಕ್ಷಣವೇ ಮಾದರಿ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಿ.ಸ್ವ್ಯಾಬ್ ಹೆಡ್ ಅನ್ನು ತಿರುಗಿಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಶೇಖರಣಾ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಕನಿಷ್ಠ 30 ಸೆಕೆಂಡುಗಳ ಕಾಲ ಬೆರೆಸಬೇಕು ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯು ಸ್ಯಾಂಪ್ಲಿಂಗ್ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಹೊರಹಾಕಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಬೇಕು.
4. ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ (20~ 25℃) 1ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಕಾವು ಕೊಡುವುದು, ಲಿಸಿಸ್ ಬಫರ್‌ನ ತಯಾರಿಕೆಯು ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿದೆ.
5. 25μl ಸಿಸ್ಟಮ್ RT-PCR ಮತ್ತು RT-LAMP ಎರಡೂ ಪತ್ತೆ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗಾಗಿ 10μl ಮೊತ್ತದ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸೇರ್ಪಡೆಯೊಂದಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುತ್ತವೆ.
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
1. ಒಂದೇ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ಗೆ ಅನುಗುಣವಾದ ಮಾದರಿ ಡೈರೆಕ್ಟ್ ಲೈಸೇಟ್‌ನ ಕನಿಷ್ಠ ಮೊತ್ತವನ್ನು 400μl ಗೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು, ಇದನ್ನು ಪರೀಕ್ಷೆಯ ಅಗತ್ಯಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು.
2. ಮಾದರಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಕಾರಕದಿಂದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ನಂತರ, ಮುಂದಿನ ಹಂತದ ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಸಾಧ್ಯವಾದಷ್ಟು ಬೇಗ ನಡೆಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮಧ್ಯಂತರ ಕಾಯುವ ಸಮಯವು 1 ಗಂಟೆಗಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿರುತ್ತದೆ.
3. ಮಾದರಿ ಲೈಸೇಟ್‌ನ pH ಆಮ್ಲೀಯವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪತ್ತೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರಬೇಕು.ಇದು pH ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ PCR, RT-PCR ಮತ್ತು LAMP ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಪತ್ತೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಬಫರ್ ಇಲ್ಲದೆ LAMP ವರ್ಣಮಾಪನ ಪತ್ತೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲ.
