RT-LAMP ಕಲರ್ಮೆಟ್ರಿಕ್ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ HCB5204A
ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಬಫರ್, RT-ಎಂಜೈಮ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣ (Bst DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಮತ್ತು ಶಾಖ-ನಿರೋಧಕ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್), ಲೈಯೋಫೈಲೈಸ್ಡ್ ಪ್ರೊಟೆಕ್ಟರ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಕ್ರೋಮೋಜೆನಿಕ್ ಡೈ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ.ಬಳಸಲು, ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಕಿಣ್ವ ಮತ್ತು ಪ್ರೈಮರ್ ಅನ್ನು ಬೆರೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ;ಲೈಯೋಫೈಲೈಸ್ಡ್ ಪ್ರೊಟೆಕ್ಟರ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವುದು ನೇರವಾಗಿರುತ್ತದೆ.ಇದನ್ನು ಲೈಯೋಫೈಲೈಜರ್‌ಗೆ ಸಂಪರ್ಕಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಲೈಫೈಲೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಬಳಸಿದಾಗ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಮಾತ್ರ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಈ ಕಿಟ್ ವರ್ಧನೆಯ ವೇಗದ, ಸ್ಪಷ್ಟವಾದ ದೃಷ್ಟಿಗೋಚರ ಪತ್ತೆಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದಲ್ಲಿ ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಧನಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಹಳದಿ ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ಬದಲಾಯಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಘಟಕ
| ಘಟಕ | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| ಲೂಪ್-ಮಧ್ಯವರ್ತಿ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬಫರ್ (ವರ್ಣದೊಂದಿಗೆ) | 0.96 ಮಿ.ಲೀ | 4.80 ಮಿಲಿ×2 | 9.60 ಮಿಲಿ×10 |
| ಆರ್ಟಿ-ಕಿಣ್ವಗಳ ಮಿಶ್ರಣ | 270 μL | 2.70 ಮಿ.ಲೀ | 2.70 ಮಿಲಿ×10 |
| ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ಡ್ ರಕ್ಷಕ | 0.96 ಮಿಲಿ×2 | 9.60 ಮಿಲಿ×2 | 9.60 ಮಿಲಿ×20 |
ಅರ್ಜಿಗಳನ್ನು
ಡಿಎನ್ಎ ಅಥವಾ ಆರ್ಎನ್ಎ ಐಸೊಥರ್ಮಲ್ ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ.
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಡ್ರೈ ಐಸ್ನೊಂದಿಗೆ ಸಾಗಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, -25~ -15℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ.ಆಗಾಗ್ಗೆ ಫ್ರೀಜ್-ಲೇಪವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ, ಉತ್ಪನ್ನವು 12 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ ಮಾನ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
ಶಿಷ್ಟಾಚಾರ
1.ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಬಳಸಬೇಕಾದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಕರಗಿಸಿ.ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಲು ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳನ್ನು ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಅಥವಾ ತಲೆಕೆಳಗು ಮಾಡಿ, ನಂತರ ಟ್ಯೂಬ್‌ನ ಕೆಳಭಾಗಕ್ಕೆ ದ್ರವವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಿ.
2.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ತಯಾರಿ.ಈ ಕಾರಕವನ್ನು ಎರಡು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಬಹುದು, ದ್ರವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮಿಶ್ರಣ ಮತ್ತು ಲೈಫೈಲೈಸ್ಡ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಮಿಶ್ರಣ.
1) ದ್ರವ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
| ಘಟಕ | ಸಂಪುಟ |
| ಲೂಪ್-ಮಧ್ಯವರ್ತಿ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬಫರ್ (ವರ್ಣದೊಂದಿಗೆ) | 10 μL |
| ಆರ್ಟಿ-ಕಿಣ್ವಗಳ ಮಿಶ್ರಣ | 2.8 μL |
| 10 × ಪ್ರೈಮರ್ ಮಿಕ್ಸ್a | 5 μL |
| ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು DNA/RNA b | × μL |
| ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಮುಕ್ತ ನೀರು | 50 μL ವರೆಗೆ |
2) ಲಿಯೋಫಿಲೈಸೇಶನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಮಿಶ್ರಣ
① ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ಡ್ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
| ಘಟಕ | ಸಂಪುಟ |
| ಲೂಪ್-ಮಧ್ಯವರ್ತಿ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಬಫರ್ (ವರ್ಣದೊಂದಿಗೆ) | 10 μL |
| ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ಡ್ ರಕ್ಷಕ | 20 μL |
| ಆರ್ಟಿ-ಕಿಣ್ವಗಳ ಮಿಶ್ರಣ | 2.8 μL |
| ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಮುಕ್ತ ನೀರು | 50 μL ವರೆಗೆ |
② ಲೈಯೋಫಿಲೈಸೇಶನ್: ತಯಾರಾದ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 50μL ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಲೈಯೋಫೈಲೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ
③ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ
| ಘಟಕ | ಸಂಪುಟ |
| ಲೈಯೋಫಿಲೈಸ್ಡ್ ಮಿಶ್ರಣ | 1 ತುಣುಕು |
| 10 × ಪ್ರೈಮರ್ ಮಿಕ್ಸ್a | 5 μL |
| ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳು DNA/RNA b | × μL |
| ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಮುಕ್ತ ನೀರು | 50 μL ವರೆಗೆ |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು:
1) ಎ.10×ಪ್ರೈಮರ್ ಮಿಕ್ಸ್ : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM ಲೂಪ್ F/B;
2) ಬಿ.ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಟೆಂಪಲ್ಗೆ DEPC (ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಕರಗುವ) ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
1.30-45 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 65 ° C ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಿ, ಇದನ್ನು ಬಣ್ಣ ಬದಲಾವಣೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಸೂಕ್ತವಾಗಿ ವಿಸ್ತರಿಸಬಹುದು.
2.ಬರಿಗಣ್ಣಿನ ಪ್ರಕಾರ, ಹಳದಿ ಧನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಕೆಂಪು ಋಣಾತ್ಮಕವಾಗಿತ್ತು.
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
1.ಬಫರ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ನ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ಉಪ್ಪು ಕಾಣಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು, ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಸುಳಿಯಬಹುದು ಅಥವಾ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಲು ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳನ್ನು ಹಲವಾರು ಬಾರಿ ತಿರುಗಿಸಬಹುದು.
2.ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳ ಸ್ಥಿತಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ತಾಪಮಾನವನ್ನು 62 ℃ ಮತ್ತು 68 ℃ ನಡುವೆ ಹೊಂದುವಂತೆ ಮಾಡಬಹುದು.
3.ಪ್ಯಾಕೇಜ್ ಮಾಡಲಾದ ಕಾರಕಗಳನ್ನು ದೀರ್ಘಕಾಲದವರೆಗೆ ಗಾಳಿಗೆ ಒಡ್ಡಬಾರದು.
4.ಕೆಂಪು ಮತ್ತು ಹಳದಿ ಬಣ್ಣ ಬದಲಾವಣೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ pH ಬದಲಾವಣೆಯ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ, ದಯವಿಟ್ಟು ಹೊಂದಿರುವ ಟ್ರಿಸ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಬಳಸಬೇಡಿ, ddH ಅನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ2O ಶೇಖರಿಸಿದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲ;
5.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ, ಲೈಫೈಲೈಸೇಶನ್ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಸಂಸ್ಕರಣೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಸೇರಿಸುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ತಯಾರಿಕೆ ಸೇರಿದಂತೆ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಬೇಕು;
6.ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು, ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಕ್ಲೀನ್ ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ಇತರರಲ್ಲಿ ಸುಳ್ಳು ಧನಾತ್ಮಕ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಕೋಣೆಯ ಫ್ಯೂಮ್ ಹುಡ್‌ಗೆ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಿ.
