ವೈರಲ್ DNA/RNA ಹೊರತೆಗೆಯುವ ಕಿಟ್
ನಾಸೊಫಾರ್ಂಜಿಯಲ್ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ಗಳು, ಪರಿಸರ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ಗಳು, ಸೆಲ್ ಕಲ್ಚರ್ ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಟಿಶ್ಯೂ ಹೋಮೋಜೆನೇಟ್ ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್‌ಗಳಂತಹ ಮಾದರಿಗಳಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ ಶುದ್ಧತೆಯ ವೈರಲ್ DNA/RNA ಯನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಈ ಕಿಟ್ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.ಕಿಟ್ ಸಿಲಿಕಾ ಮೆಂಬರೇನ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ, ಇದು ಉತ್ತಮ ಗುಣಮಟ್ಟದ ವೈರಲ್ DNA/RNA ಯನ್ನು ಹೊರತೆಗೆಯಲು ಫಿನಾಲ್/ಕ್ಲೋರೋಫಾರ್ಮ್ ಸಾವಯವ ದ್ರಾವಕಗಳು ಅಥವಾ ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಆಲ್ಕೋಹಾಲ್ ಮಳೆಯ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ನಿವಾರಿಸುತ್ತದೆ.ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳು ಕಲ್ಮಶಗಳಿಂದ ಮುಕ್ತವಾಗಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್, ಪಿಸಿಆರ್, ಆರ್‌ಟಿ-ಪಿಸಿಆರ್, ರಿಯಲ್-ಟೈಮ್ ಪಿಸಿಆರ್, ನೆಕ್ಸ್ಟ್-ಜೆನೆರೇಶನ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸಿಂಗ್ (ಎನ್‌ಜಿಎಸ್) ಮತ್ತು ನಾರ್ದರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್‌ನಂತಹ ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಕೆಗೆ ಸಿದ್ಧವಾಗಿವೆ.
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
15 ~ 25℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ, ಮತ್ತು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಸಾಗಿಸಿ
ಘಟಕಗಳು
| ಘಟಕಗಳು | 100RXNS |
| ಬಫರ್ VL | 50 ಮಿ.ಲೀ |
| ಬಫರ್ RW | 120 ಮಿ.ಲೀ |
| RNase-ಮುಕ್ತ ddH2 O | 6 ಮಿ.ಲೀ |
| ಫಾಸ್ಟ್‌ಪ್ಯೂರ್ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು | 100 |
| ಸಂಗ್ರಹಣಾ ಕೊಳವೆಗಳು (2 ಮಿಲಿ) | 100 |
| RNase-ಮುಕ್ತ ಕಲೆಕ್ಷನ್ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು (1 .5ml) | 100 |
ಬಫರ್ VL:ಲೈಸಿಸ್ ಮತ್ತು ಬೈಂಡಿಂಗ್ಗಾಗಿ ವಾತಾವರಣವನ್ನು ಒದಗಿಸಿ.
ಬಫರ್ RW:ಉಳಿದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಇತರ ಕಲ್ಮಶಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ.
RNase-ಮುಕ್ತ ddH2O:ಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಪೊರೆಯಿಂದ ಎಲುಟ್ ಡಿಎನ್‌ಎ/ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ.
ಫಾಸ್ಟ್‌ಪ್ಯೂರ್ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಕಾಲಮ್‌ಗಳು:ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಡಿಎನ್‌ಎ/ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.
ಸಂಗ್ರಹಣಾ ಕೊಳವೆಗಳು 2 ಮಿಲಿ:ಫಿಲ್ಟರ್ ಅನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.
RNase-ಮುಕ್ತ ಕಲೆಕ್ಷನ್ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು 1.5 ಮಿಲಿ:DNA/RNA ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ.
ಅರ್ಜಿಗಳನ್ನು
ನಾಸೊಫಾರ್ಂಜಿಯಲ್ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ಗಳು, ಪರಿಸರ ಸ್ವ್ಯಾಬ್‌ಗಳು, ಸೆಲ್ ಕಲ್ಚರ್ ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಟಿಶ್ಯೂ ಹೋಮೊಜೆನೇಟ್ ಸೂಪರ್‌ನಾಟಂಟ್‌ಗಳು.
ಸ್ವಯಂ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ಮೇಟರ್ials
RNase-ಮುಕ್ತ ಪೈಪೆಟ್ ಸಲಹೆಗಳು, 1.5 ml RNase-ಮುಕ್ತ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ, ಸುಳಿಯ ಮಿಕ್ಸರ್ ಮತ್ತು ಪೈಪೆಟ್ಗಳು.
ಪ್ರಯೋಗ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ
ಜೈವಿಕ ಸುರಕ್ಷತಾ ಕ್ಯಾಬಿನೆಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಈ ಕೆಳಗಿನ ಎಲ್ಲಾ ಹಂತಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿ.
1. RNase-ಮುಕ್ತ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗೆ 200 μl ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸೇರಿಸಿ (ಸಾಕಷ್ಟು ಮಾದರಿಯಿಲ್ಲದಿದ್ದಲ್ಲಿ PBS ಅಥವಾ 0.9% NaCl ನೊಂದಿಗೆ ತಯಾರಿಸಿ), 500 μl ಬಫರ್ VL ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, 15 - 30 ಸೆಕೆಂಡ್ ಮತ್ತು ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್‌ಗೆ ಸುಳಿಯ ಮೂಲಕ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಟ್ಯೂಬ್ನ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ.
2. ಫಾಸ್ಟ್‌ಪ್ಯೂರ್ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಕಲೆಕ್ಷನ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ 2 ಮಿಲಿ ಇರಿಸಿ.ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಹಂತ 1 ರಿಂದ FastPure RNA ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ, 1 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 12,000 rpm (13,400 × g) ನಲ್ಲಿ ಸೆಂಟ್ರಿಫ್ಯೂಜ್ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು ಫಿಲ್ಟರ್ ಅನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಿ.
3. ಫಾಸ್ಟ್‌ಪ್ಯೂರ್ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಕಾಲಮ್‌ಗಳಿಗೆ 600 μl ಬಫರ್ ಆರ್‌ಡಬ್ಲ್ಯೂ ಸೇರಿಸಿ, 12,000 ಆರ್‌ಪಿಎಮ್‌ನಲ್ಲಿ (13,400 × ಗ್ರಾಂ) 30 ಸೆಕೆಂಡ್‌ಗೆ ಮತ್ತು ಫಿಲ್ಟ್ರೇಟ್ ಅನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಿ.
4. ಹಂತ 3 ಅನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸಿ.
5. 2 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 12,000 rpm (13,400 × g) ನಲ್ಲಿ ಖಾಲಿ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮಾಡಿ.
6. ಫಾಸ್ಟ್‌ಪ್ಯೂರ್ ಆರ್‌ಎನ್‌ಎ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಸ RNase-ಮುಕ್ತ ಕಲೆಕ್ಷನ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಿಗೆ 1.5 ಮಿಲಿ (ಕಿಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಒದಗಿಸಲಾಗಿದೆ) ಗೆ ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ವರ್ಗಾಯಿಸಿ ಮತ್ತು ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಮುಟ್ಟದೆಯೇ 30 - 50 μl RNase-ಮುಕ್ತ ddH2O ಅನ್ನು ಪೊರೆಯ ಮಧ್ಯಭಾಗಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಿ.ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ 1 ನಿಮಿಷ ನಿಲ್ಲಲು ಅನುಮತಿಸಿ ಮತ್ತು 1 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 12,000 rpm (13,400 × g) ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ.
7. FastPure RNA ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ತ್ಯಜಿಸಿ.ಡಿಎನ್‌ಎ/ಆರ್‌ಎನ್‌ಎಯನ್ನು ನಂತರದ ಪರೀಕ್ಷೆಗಳಿಗೆ ನೇರವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು, ಅಥವಾ ಅಲ್ಪಾವಧಿಗೆ -30~ -15 °C ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯವರೆಗೆ -85 ~-65 °C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
ಸಂಶೋಧನಾ ಬಳಕೆಗೆ ಮಾತ್ರ.ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಕೆಗೆ ಅಲ್ಲ.
1. ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶಕ್ಕೆ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಸಮೀಕರಿಸಿ.
2. ವೈರಸ್ಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕವಾಗಿವೆ.ಪ್ರಯೋಗದ ಮೊದಲು ಎಲ್ಲಾ ಅಗತ್ಯ ಸುರಕ್ಷತಾ ಮುನ್ನೆಚ್ಚರಿಕೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಿ.
3. ಮಾದರಿಯ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಘನೀಕರಿಸುವಿಕೆ ಮತ್ತು ಕರಗುವಿಕೆಯನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ, ಇದು ಅವನತಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ಅಥವಾ ಹೊರತೆಗೆಯಲಾದ ವೈರಲ್ DNA/RNA ಯ ಇಳುವರಿಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಬಹುದು.
4. ಸ್ವಯಂ-ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ಉಪಕರಣವು RNase-ಮುಕ್ತ ಪೈಪೆಟ್ ಸುಳಿವುಗಳು, 1.5 ml RNase-ಮುಕ್ತ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು, ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ, ಸುಳಿಯ ಮಿಕ್ಸರ್ ಮತ್ತು ಪೈಪೆಟ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ.
5. ಕಿಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವಾಗ, ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್, ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಲ್ಯಾಟೆಕ್ಸ್ ಕೈಗವಸುಗಳು ಮತ್ತು ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಮುಖವಾಡವನ್ನು ಧರಿಸಿ ಮತ್ತು RNase ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು RNase-ಮುಕ್ತ ಉಪಭೋಗ್ಯವನ್ನು ಬಳಸಿ.
6. ನಿರ್ದಿಷ್ಟಪಡಿಸದ ಹೊರತು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಎಲ್ಲಾ ಹಂತಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿ.
ಯಾಂತ್ರಿಕತೆ ಮತ್ತು ಕೆಲಸದ ಹರಿವು
