2×HiF Taq ಜೊತೆಗೆ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್
ಬೆಕ್ಕು ಸಂಖ್ಯೆ: HCR2014B
HIF Taq ಪ್ಲಸ್ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ (ಬಣ್ಣದ ಜೊತೆಗೆ) ಪ್ಲಸ್ HIF DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್, dNTP ಗಳು ಮತ್ತು ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ 2× ಪೂರ್ವ ಮಿಶ್ರಿತ ಪರಿಹಾರವಾಗಿದೆ.ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಎರಡು ಮೊನೊಕ್ಲೋನಲ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಮತ್ತು 3′→5′ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ PCR ಗಾಗಿ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಕಿಣ್ವಕ್ಕೆ ದೀರ್ಘವಾದ ತುಣುಕಿನ ವರ್ಧನೆಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ನೀಡಲು ವಿಸ್ತರಣಾ ಅಂಶವನ್ನು ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ವರ್ಧನೆಯ ಉದ್ದವು 13 kb ವರೆಗೆ ಇರಬಹುದು, ಕಿಣ್ವವು 5′→3′ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು 3′→5′ ಎಕ್ಸೋನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ, ಅದರ ನಿಷ್ಠೆಯು Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ನ 83 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚು, ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯ DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ಗಿಂತ 9 ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚು.ಸಂಕೀರ್ಣ ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳ ವರ್ಧನೆಗೆ ಇದು ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ, ವರ್ಧನೆಯ ಉತ್ಪನ್ನವು ಮೊಂಡಾದ ಅಂತ್ಯವಾಗಿದೆ.
2×HIF Taq ಜೊತೆಗೆ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ (ಡೈ ಜೊತೆ) ವೇಗದ ಮತ್ತು ಸುಲಭ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂವೇದನೆ, ಬಲವಾದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ, ಉತ್ತಮ ಸ್ಥಿರತೆ, ಇತ್ಯಾದಿಗಳ ಅನುಕೂಲಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಮಾತ್ರ ಸೇರಿಸುವ ಅಗತ್ಯವಿದೆ ಮತ್ತು ಎರಡು-ರಿಂದ ವರ್ಧಿಸಬಹುದು. ಹಂತದ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್, ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಹಂತಗಳನ್ನು ಸರಳಗೊಳಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಸಮಯವನ್ನು ಉಳಿಸುವುದು.ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಸೂಚಕ ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪಿಸಿಆರ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ಗೆ ಬಳಸಬಹುದು.ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಉತ್ಪನ್ನವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ರಕ್ಷಣಾತ್ಮಕ ಏಜೆಂಟ್ ಅನ್ನು ಸಹ ಒಳಗೊಂಡಿದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಶ್ರಣವು ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫ್ರೀಜ್-ಲೇಪ ನಂತರ ಸ್ಥಿರ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ.
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಉತ್ಪನ್ನಗಳನ್ನು 1 ವರ್ಷಕ್ಕೆ -25~-15℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು.
ವಿಶೇಷಣಗಳು
ಉತ್ಪನ್ನದ ವಿವರಣೆ | ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ |
ಏಕಾಗ್ರತೆ | 2× |
ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ | ಅಂತರ್ನಿರ್ಮಿತ ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ |
ಓವರ್ಹ್ಯಾಂಗ್ | ಮೊಂಡಾದ |
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವೇಗ | ಕ್ಷಿಪ್ರ |
ಗಾತ್ರ (ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನ) | 13kb ವರೆಗೆ |
ಸಾರಿಗೆ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು | ಡ್ರೈ ಐಸ್ |
ಉತ್ಪನ್ನ ಪ್ರಕಾರ | ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿಷ್ಠೆಯ PCR ಪ್ರಿಮಿಕ್ಸ್ಗಳು |
ಸೂಚನೆಗಳು
1.ಪಿಸಿಆರ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್
ಘಟಕಗಳು | ಪರಿಮಾಣ (μL) |
DNA ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ | ಸೂಕ್ತ |
ಫಾರ್ವರ್ಡ್ ಪ್ರೈಮರ್ (10 μmol/L) | 2.5 |
ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್ (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF Taq ಜೊತೆಗೆ ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ | 25 |
ddH2O | 50 ಗೆ |
2.ವಿವಿಧ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ಗಳ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ
ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಪ್ರಕಾರ | ತುಣುಕುಗಳನ್ನು 1kb ನಿಂದ 10 kb ವರೆಗೆ ವರ್ಧಿಸಿ |
ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್ಎ | 50ng-200 ng |
ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಅಥವಾ ವೈರಲ್ ಡಿಎನ್ಎ | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (ಅಂತಿಮ PCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಪರಿಮಾಣದ 10% ಮೀರಬಾರದು) |
3.ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
1) ಎರಡು-ಹಂತದ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ (ಸಂಕೀರ್ಣತೆಯ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್)
ಸೈಕಲ್ ಹೆಜ್ಜೆ | ತಾಪ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್ಗಳು |
ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 98℃ | 3 ನಿಮಿಷ | 1 |
ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 98℃ | 10 ಸೆ | 30-35 |
ವಿಸ್ತರಣೆ | 68℃ | 30 ಸೆಕೆಂಡ್/ಕೆಬಿ | |
ಅಂತಿಮ ವಿಸ್ತರಣೆ | 72℃ | 5 ನಿಮಿಷ | 1 |
2) ಮೂರು-ಹಂತದ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ (ನಿಯಮಿತ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್)
ಸೈಕಲ್ ಹೆಜ್ಜೆ | ತಾಪ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್ಗಳು |
ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 98℃ | 3 ನಿಮಿಷ | 1 |
ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 98℃ | 10 ಸೆ | 30-35 |
ಅನೆಲಿಂಗ್ | 60℃ | 20 ಸೆ | |
ವಿಸ್ತರಣೆ | 72℃ | 30 ಸೆಕೆಂಡ್/ಕೆಬಿ | |
ಅಂತಿಮ ವಿಸ್ತರಣೆ | 72℃ | 5 ನಿಮಿಷ | 1 |
3) ಅನೆಲಿಂಗ್ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ (ಸಂಕೀರ್ಣತೆಯ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್)
ಸೈಕಲ್ ಹೆಜ್ಜೆ | ತಾಪಮಾನ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್ಗಳು |
ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 98℃ | 3 ನಿಮಿಷ | 1 |
ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 98℃ | 10 ಸೆ | 15 (ಪ್ರತಿ ಚಕ್ರಕ್ಕೆ 1℃ ಕಡಿತ) |
ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಅನೆಲಿಂಗ್ | 70-55℃ | 20 ಸೆ | |
ವಿಸ್ತರಣೆ | 72℃ | 30 ಸೆಕೆಂಡ್/ಕೆಬಿ | |
ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 98℃ | 10 ಸೆ |
20 |
ಅನೆಲಿಂಗ್ | 55℃ | 20 ಸೆ | |
ವಿಸ್ತರಣೆ | 72℃ | 30 ಸೆಕೆಂಡ್/ಕೆಬಿ | |
ಅಂತಿಮ ವಿಸ್ತರಣೆ | 72℃ | 5 ನಿಮಿಷ | 1 |
ವಿಭಿನ್ನ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ವೈಶಿಷ್ಟ್ಯಗಳು
ಪ್ರೋಟೋಕೋl | ಎರಡು-ಹಂತ | ಮೂರು-ಹಂತ | ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಅನೆಲಿಂಗ್ |
ವಿಶೇಷಣ | ವೇಗವಾಗಿ | ಮಾಧ್ಯಮ | ನಿಧಾನ |
ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ | ಹೆಚ್ಚು | ಮಾಧ್ಯಮ | ಹೆಚ್ಚು |
ಪಿಸಿಆರ್ ಇಳುವರಿ | ಮಾಧ್ಯಮ | ಹೆಚ್ಚು | ಮಾಧ್ಯಮ |
ಪತ್ತೆ ದರ | ಹೆಚ್ಚು | ಮಾಧ್ಯಮ | ಹೆಚ್ಚು |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
ನಿಮ್ಮ ಆರೋಗ್ಯ ಮತ್ತು ಸುರಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ದಯವಿಟ್ಟು ಅಗತ್ಯವಾದ ಪಿಪಿಇ, ಅಂತಹ ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್ ಮತ್ತು ಕೈಗವಸುಗಳನ್ನು ಧರಿಸಿ!