ಒಂದು ಹಂತ RT-qPCR SYBR ಗ್ರೀನ್ ಪ್ರಿಮಿಕ್ಸ್
ಬೆಕ್ಕು ಸಂಖ್ಯೆ: HCB5140A
ಒಂದು ಹಂತದ RT-qPCR ಸೈಬರ್ ಗ್ರೀನ್ ಪ್ರಿಮಿಕ್ಸ್ SYBR ಗ್ರೀನ್ I ಡೈಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವಾಗಿದೆ.ಜೀನ್-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು, ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಮತ್ತು qPCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಒಂದು ಟ್ಯೂಬ್‌ನಲ್ಲಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಕ್ಯಾಪ್-ಓಪನಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಪೈಪೆಟಿಂಗ್ ಕಾರ್ಯಾಚರಣೆಗಳ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುತ್ತದೆ, ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮಾಲಿನ್ಯದ ಅಪಾಯವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಆರ್ಎನ್ಎ ಮಾದರಿಗಳಿಗಾಗಿ, ಕಿಟ್ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾದ ಸಿಡಿಎನ್‌ಎ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಶಾಖ-ನಿರೋಧಕ ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಟೇಸ್ ಮತ್ತು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ಹಾಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಟಾಕ್ ಡಿಎನ್ಎ ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಬಫರ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ, ಕಿಟ್‌ನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯು ಹೆಚ್ಚು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ ಗುರಿಗಳಿಗೆ 0.1 pg ವರೆಗೆ ಮತ್ತು ಮಧ್ಯಮವಾಗಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ ಗುರಿಗಳಿಗೆ 1 pg ವರೆಗೆ ಹೆಚ್ಚಾಗಿರುತ್ತದೆ.ಡಿಎನ್ಎ ಮಾದರಿಗಳ ವರ್ಧನೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕೆ ಕಿಟ್ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ.ವಿಭಿನ್ನ ಸಸ್ಯ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಮಾದರಿಗಳು, ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳಿಂದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಪತ್ತೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣವನ್ನು ಇದು ಶಕ್ತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಘಟಕಗಳು
| No | ಹೆಸರು | ಸಂಪುಟ | ಸಂಪುಟ |
| 1 | ಸುಧಾರಿತ ಬಫರ್ | 250 μL | 2×1.25 ಮಿಲಿ |
| 2 | ಸುಧಾರಿತ ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ | 20 μL | 200 μL |
| 3 | ಆರ್‌ನೇಸ್ ಫ್ರೀ ಎಚ್2O | 250 μL | 2×1.25 ಮಿಲಿ |
ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು
ಈ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು 1 ವರ್ಷದವರೆಗೆ ಬೆಳಕಿನಿಂದ ದೂರದಲ್ಲಿ -25~-15℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬೇಕು.
ಸೂಚನೆಗಳು
1.ರಿಯಾಕ್ಷನ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಕಾನ್ಫಿಗರೇಶನ್d
| ಘಟಕಗಳು | ಪರಿಮಾಣ (μL) | ಪರಿಮಾಣ (μL) | ಅಂತಿಮ ಏಕಾಗ್ರತೆ |
| ಸುಧಾರಿತ ಬಫರ್ | 12.5 | 25 | 1× |
| ಸುಧಾರಿತ ಕಿಣ್ವ ಮಿಶ್ರಣ | 1 | 2 | - |
| ಫಾರ್ವರ್ಡ್ ಪ್ರೈಮರ್ (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್ (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| ಆರ್ಎನ್ಎ ಟ್ಯಾಂಪ್ಲೇಟ್b | X | X | - |
| ಆರ್‌ನೇಸ್ ಫ್ರೀ ಎಚ್2ಓc | 25ಕ್ಕೆ | 50 ಗೆ | - |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು:
1) ಎ.ಟಿಅವನ ಅಂತಿಮ ಪ್ರೈಮರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯು 0.2 μmol/L ಆಗಿತ್ತು, ಇದನ್ನು 0.1 ಮತ್ತು 1μmol/L ನಡುವೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು.
2) ಬಿ.ಕಾರಕವು ಅತ್ಯಂತ ಸಂವೇದನಾಶೀಲವಾಗಿದೆ, ಒಟ್ಟು RNA 1pg-1μg ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿದೆ, ಮತ್ತು ಮಾನವ ಮಾದರಿಗಳ ಪರೀಕ್ಷೆಯು 1 pg-100 ng ನ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಇನ್‌ಪುಟ್ ಅನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ, 15-30 ರ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಒಟ್ಟಾರೆ Ct ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ.
3) ಸಿ.ಗುರಿ ಜೀನ್ ವರ್ಧನೆಯ ಸಿಂಧುತ್ವ ಮತ್ತು ಪುನರುತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು 20μL ಅಥವಾ 50μL ಅನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
4) ಡಿ.ದಯವಿಟ್ಟು ಅಲ್ಟ್ರಾ-ಕ್ಲೀನ್ ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಿ ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಶೇಷ-ಮುಕ್ತ ಸಲಹೆಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ;ಫಿಲ್ಟರ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಜ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಲಹೆಗಳನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ಅಡ್ಡ ಮಾಲಿನ್ಯ ಮತ್ತು ಏರೋಸಾಲ್ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ.
2.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮ
| ಸೈಕಲ್ ಹೆಜ್ಜೆ | ತಾಪ | ಸಮಯ | ಸೈಕಲ್‌ಗಳು |
| ರಿವರ್ಸ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನ | 50℃a | 6 ನಿಮಿಷಗಳು | 1 |
| ಆರಂಭಿಕ ಡಿನಾಟರೇಶನ್ | 95℃ | 5 ನಿಮಿಷಗಳು | 1 |
| ವರ್ಧನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ | 95℃ | 15 ಸೆ | 40 |
| 60℃b | 30 ಸೆ | ||
| ಕರಗುವ ಕರ್ವ್ ಹಂತ | ಉಪಕರಣ ಡೀಫಾಲ್ಟ್‌ಗಳು | 1 | |
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು:
1) ಎ.ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಗತ್ಯಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಹಿಮ್ಮುಖ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ತಾಪಮಾನವನ್ನು 50-55 ° C ನಡುವೆ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಬಹುದು.ಡಿಎನ್ಎ ಮಾದರಿಗಳಿಗೆ, ರಿವರ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಕ್ರಿಪ್ಶನ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬಿಟ್ಟುಬಿಡಬಹುದು.
2) ಬಿ.ವಿಶೇಷ ಸಂದರ್ಭಗಳಲ್ಲಿ ಅನೆಲಿಂಗ್/ವಿಸ್ತರಣೆ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಪ್ರೈಮರ್ Tm ಮೌಲ್ಯಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು, 60 ° C ಅನ್ನು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು
1. ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಸಂಶೋಧನಾ ಬಳಕೆಗೆ ಮಾತ್ರ.
2. ನಿಮ್ಮ ಸುರಕ್ಷತೆಗಾಗಿ ದಯವಿಟ್ಟು ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಬಿಸಾಡಬಹುದಾದ ಕೈಗವಸುಗಳೊಂದಿಗೆ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸಿ.
