ಯುನಿವರ್ಸಲ್ SYBR ಹಸಿರು qPCR ಪ್ರೀಮಿಕ್ಸ್ (ನೀಲಿ)

ಬೆಕ್ಕು ಸಂಖ್ಯೆ: HCB5041B

ಯುನಿವರ್ಸಲ್ ಬ್ಲೂ qPCR ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್ (ಡೈ ಬೇಸ್ಡ್) 2×ನೈಜ-ಸಮಯದ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್‌ಗೆ ಪೂರ್ವ-ಪರಿಹಾರವಾಗಿದ್ದು, ಹೆಚ್ಚಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯಿಂದ ನಿರೂಪಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ, ಇದು ನೀಲಿ ಬಣ್ಣದ್ದಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಮಾದರಿ ಸೇರ್ಪಡೆ ಟ್ರೇಸಿಂಗ್‌ನ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.ಮಾದರಿ ತಯಾರಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪ್ರೈಮರ್ ಅನೆಲಿಂಗ್‌ನಿಂದಾಗಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ತಡೆಯಲು ಕೋರ್ ಘಟಕವಾದ Taq DNA ಪಾಲಿಮರೇಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಹಾಟ್ ಸ್ಟಾರ್ಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತದೆ.ಅದೇ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಪಿಸಿಆರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ವಿಭಿನ್ನ GC ವಿಷಯಗಳೊಂದಿಗೆ (30 ~ 70%) ಜೀನ್‌ಗಳ ವರ್ಧನೆಯನ್ನು ಸಮೀಕರಿಸಲು ಸೂತ್ರವು ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ PCR ವ್ಯಾಪಕ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಉತ್ತಮ ರೇಖಾತ್ಮಕ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಪಡೆಯಬಹುದು. ಪ್ರದೇಶ.ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ವಿಶೇಷ ROX ನಿಷ್ಕ್ರಿಯ ಉಲ್ಲೇಖದ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ qPCR ಉಪಕರಣಗಳಿಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುತ್ತದೆ.ವಿವಿಧ ಉಪಕರಣಗಳಲ್ಲಿ ROX ನ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸುವುದು ಅನಿವಾರ್ಯವಲ್ಲ.ವರ್ಧನೆಗಾಗಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಪ್ರೈಮರ್ಗಳು ಮತ್ತು ಟೆಂಪ್ಲೆಟ್ಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುವುದು ಮಾತ್ರ ಅವಶ್ಯಕ.

ಘಟಕಗಳು

ಯುನಿವರ್ಸಲ್ ಬ್ಲೂ qPCR ಮಾಸ್ಟರ್ ಮಿಕ್ಸ್

ಶೇಖರಣಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು

ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಐಸ್ ಪ್ಯಾಕ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ರವಾನಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 18 ತಿಂಗಳವರೆಗೆ -25℃~-15℃ ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸುವಾಗ ಅಥವಾ ಸಿದ್ಧಪಡಿಸುವಾಗ ಬಲವಾದ ಬೆಳಕಿನ ವಿಕಿರಣವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸುವುದು ಅವಶ್ಯಕ.

ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆ

ಸೂಚನೆಗಳು

1.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ

[ಗಮನಿಸಿ]: ತೀವ್ರವಾದ ಅಲುಗಾಡುವಿಕೆಯಿಂದ ಅತಿಯಾದ ಗುಳ್ಳೆಗಳನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಬಳಕೆಗೆ ಮೊದಲು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ.

a) ಪ್ರೈಮರ್ ಸಾಂದ್ರತೆ: ಅಂತಿಮ ಪ್ರೈಮರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯು 0.2μmol/L ಆಗಿದೆ, ಮತ್ತು 0.1 ಮತ್ತು 1.0μmol/L ನಡುವೆ ಸರಿಹೊಂದಿಸಬಹುದು.

ಬಿ) ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸಾಂದ್ರತೆ: ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸದ cDNA ಸ್ಟಾಕ್ ಪರಿಹಾರವಾಗಿದ್ದರೆ, ಬಳಸಿದ ಪರಿಮಾಣವು qPCR ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಒಟ್ಟು ಪರಿಮಾಣದ 1/10 ಅನ್ನು ಮೀರಬಾರದು.

c) ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆ: cDNA ಸ್ಟಾಕ್ ಪರಿಹಾರವನ್ನು 5-10 ಬಾರಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ವರ್ಧನೆಯಿಂದ ಪಡೆದ Ct ಮೌಲ್ಯವು 20-30 ಚಕ್ರಗಳಾಗಿದ್ದಾಗ ಸೇರಿಸಲಾದ ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್‌ನ ಸೂಕ್ತ ಮೊತ್ತವು ಉತ್ತಮವಾಗಿರುತ್ತದೆ.

d) ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆ: ಗುರಿ ಜೀನ್ ವರ್ಧನೆಯ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವ ಮತ್ತು ಪುನರಾವರ್ತಿತತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು 20μL ಅಥವಾ 50μL ಅನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.

ಇ) ಸಿಸ್ಟಮ್ ತಯಾರಿ: ದಯವಿಟ್ಟು ಸೂಪರ್ ಕ್ಲೀನ್ ಬೆಂಚ್‌ನಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಿ ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ ಶೇಷವಿಲ್ಲದೆ ಸಲಹೆಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ;ಫಿಲ್ಟರ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಜ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸುಳಿವುಗಳನ್ನು ಬಳಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.ಅಡ್ಡ ಮಾಲಿನ್ಯ ಮತ್ತು ಏರೋಸಾಲ್ ಮಾಲಿನ್ಯವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಿ.

2.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮ

ಪ್ರಮಾಣಿತ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮ

ತ್ವರಿತ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮ

[ಗಮನಿಸಿ]: ಬಹುಪಾಲು ಜೀನ್‌ಗಳಿಗೆ ವೇಗದ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಸೂಕ್ತವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ವೈಯಕ್ತಿಕ ಸಂಕೀರ್ಣ ದ್ವಿತೀಯಕ ರಚನೆಯ ಜೀನ್‌ಗಳಿಗೆ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂಗಳನ್ನು ಪ್ರಯತ್ನಿಸಬಹುದು.

ಎ) ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನ ಮತ್ತು ಸಮಯ: ದಯವಿಟ್ಟು ಪ್ರೈಮರ್ ಮತ್ತು ಗುರಿ ಜೀನ್‌ನ ಉದ್ದಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಹೊಂದಿಸಿ.

ಬಿ) ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಸ್ವಾಧೀನ (★): ದಯವಿಟ್ಟು ಉಪಕರಣದ ಬಳಕೆಗಾಗಿ ಸೂಚನೆಗಳಲ್ಲಿನ ಅಗತ್ಯತೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ವಿಧಾನವನ್ನು ಹೊಂದಿಸಿ.

ಸಿ) ಮೆಲ್ಟಿಂಗ್ ಕರ್ವ್: ಉಪಕರಣ ಡೀಫಾಲ್ಟ್ ಪ್ರೋಗ್ರಾಂ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು.

3. ಫಲಿತಾಂಶ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ 

ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಕನಿಷ್ಠ ಮೂರು ಜೈವಿಕ ಪ್ರತಿಕೃತಿಗಳ ಅಗತ್ಯವಿದೆ.ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ನಂತರ, ವರ್ಧನೆಯ ಕರ್ವ್ ಮತ್ತು ಕರಗುವ ಕರ್ವ್ ಅನ್ನು ದೃಢೀಕರಿಸುವ ಅಗತ್ಯವಿದೆ.

3.1 ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಕರ್ವ್:

ಪ್ರಮಾಣಿತ ಆಂಪ್ಲಿಫಿಕೇಶನ್ ಕರ್ವ್ ಎಸ್-ಆಕಾರದಲ್ಲಿದೆ.Ct ಮೌಲ್ಯವು 20 ಮತ್ತು 30 ರ ನಡುವೆ ಬಿದ್ದಾಗ ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಅತ್ಯಂತ ನಿಖರವಾಗಿರುತ್ತದೆ. Ct ಮೌಲ್ಯವು 10 ಕ್ಕಿಂತ ಕಡಿಮೆಯಿದ್ದರೆ, ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಅನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವುದು ಮತ್ತು ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಮತ್ತೊಮ್ಮೆ ಕೈಗೊಳ್ಳುವುದು ಅವಶ್ಯಕ.Ct ಮೌಲ್ಯವು 30-35 ರ ನಡುವೆ ಇದ್ದಾಗ, ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಸಾಂದ್ರತೆ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದು ಅವಶ್ಯಕ.Ct ಮೌಲ್ಯವು 35 ಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿರುವಾಗ, ಪರೀಕ್ಷಾ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಜೀನ್‌ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಗುಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು.

3.2 ಕರಗುವ ವಕ್ರರೇಖೆ:

ಕರಗುವ ವಕ್ರರೇಖೆಯ ಏಕೈಕ ಶಿಖರವು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯು ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮಾಡಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ;ಕರಗುವ ವಕ್ರರೇಖೆಯು ಎರಡು ಅಥವಾ ಬಹು ಶಿಖರಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಿದರೆ, ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ.ಕರಗುವ ಕರ್ವ್ ಡಬಲ್ ಶಿಖರಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಗುರಿಯಲ್ಲದ ಶಿಖರವು ಪ್ರೈಮರ್ ಡೈಮರ್ ಅಥವಾ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಗರೋಸ್ ಜೆಲ್ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್‌ನಿಂದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆಯಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ನಿರ್ಣಯಿಸುವುದು ಅವಶ್ಯಕ.ಇದು ಪ್ರೈಮರ್ ಡೈಮರ್ ಆಗಿದ್ದರೆ, ಪ್ರೈಮರ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಅಥವಾ ಹೆಚ್ಚಿನ ವರ್ಧನೆಯ ದಕ್ಷತೆಯೊಂದಿಗೆ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಮರುವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲು ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ವರ್ಧನೆ ಆಗಿದ್ದರೆ, ದಯವಿಟ್ಟು ಅನೆಲಿಂಗ್ ತಾಪಮಾನವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ ಅಥವಾ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯೊಂದಿಗೆ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳನ್ನು ಮರುವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಿ.

ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು

ನಿಮ್ಮ ಆರೋಗ್ಯ ಮತ್ತು ಸುರಕ್ಷತೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ದಯವಿಟ್ಟು ಅಗತ್ಯವಾದ ಪಿಪಿಇ, ಅಂತಹ ಲ್ಯಾಬ್ ಕೋಟ್ ಮತ್ತು ಕೈಗವಸುಗಳನ್ನು ಧರಿಸಿ!

ಈ ಉತ್ಪನ್ನವು ಸಂಶೋಧನಾ ಬಳಕೆಗೆ ಮಾತ್ರ!